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LAMP恒温扩增试剂盒(OTG可视染料法,冻干制剂)
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详细内容
本试剂盒基于LAMP技术,LAMP是一种新型核酸扩增技术,采用4或6条能够识别目的基因上的6个特异区域的引物,依赖于Bst DNA聚合酶的强链置换活性,在30~60分钟内DNA扩增可达109~1010倍。本试剂盒为冻干制品,相对于液体型产品更加稳定,灵敏度更高,操作更加方便,通常在30min内完成检测。

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| LAMP恒温扩增试剂盒(OTG可视染料法,冻干制剂) | Lyophilized LAMP Kit(Visual OTG Dye) | 48T|960T |
Bst DNA聚合酶是Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分,具有很强的链置换活性,以及5’→3’的DNA聚合酶活性,因此可以应用于LAMP实验。该制品内含Bst DNA聚合酶4.0因此既可以扩增DNA,也可以直接扩增RNA分子。
橙绿变色染料OTG(Orange to Green)以冻干的形式预加在8联管盖上。在LAMP反应完毕后(在反应完毕,务必不能将管盖上染料混入反应液中),将0.2mL EP管颠倒溶解OTG染料后。LAMP的反应产物将与OTG染料形成强烈的绿色肉眼可见变色反应(阳性),而未发生扩增的EP管为深橙色(阴性)。
保存条件:-20℃,有效期一年,可常温运输。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
具栖冬青苷 HPLC≥98% 20mg 人alpha突触核蛋白(淀粉样体非A4成分蛋白)低聚物(SNCA oligomer)试剂盒 Human SNCA oligomer ELISA Kit
聚谷氨酸紫杉醇 HPLC≥98% 20mg 英文名称MouseIerleukin27ELISAKit小鼠白介素27(IL-27)规格:96T/48T
绢毛榄仁苷 HPLC≥98% 20mg 冰冻切片总胆舒尔茨染色试剂盒50
决明素 HPLC≥97% 20mg RatChorionicGonadoophinβ,β-CGELISA试剂盒大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
咖啡醇 HPLC≥98% 20mg 小鼠脂联素(Adiponectin,Acrp30)ELISA试剂盒 ,英文名: Adiponectin,Acrp30 ELISA Kit
咖啡酸 HPLC≥98% 20mg 牛细胞因子ELISA检测试剂盒BovinelymphocytefactorELISAKit 96T/48T
咖啡酸乙酯 HPLC≥98% 20mg 人Alpha-D 酚/维生素E(Alpha-D TPL)试剂盒 Human Alpha-D-tocopherol,Alpha-D TPL ELISA Kit
卡巴他赛 HPLC≥98% 20mg 英文名称MouseIerleukin23ELISAKit小鼠白介素23(IL-23)规格:96T/48T
卡比多巴 HPLC≥98% 20mg 冰冻切片总游离胆菲律宾(FILIPIN)荧光染色试剂盒50
卡枯醇 HPLC≥98% 20mg RatChorionicGonadoophin,CGELISA试剂盒大鼠绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人核因子κB受体激活因子配基(RANκL)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:TNFSF11, TRANCE, RANKL, CD254, ODF, OPGL, OPTB2, hRANKL2, sOdf Human RANκL(Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B Ligand) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组RANκL浓度
LAMP恒温扩增试剂盒(OTG可视染料法,冻干制剂)人蛋白酶3(PR3)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:PRTN3, ACPA, AGP7, C-ANCA, CANCA, MBN, MBT, NP-4, NP4, P29, PR-3, PR3, proteinase 3 Human PR3(Proteinase 3) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组PR3浓度
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