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猪 ACTB内参引物(10μM)
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详细内容
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| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 猪 ACTB内参引物(10μM) | Pig ACTB Endogenous Reference Genes Primers, 10 μM | 100μl |
概述
实时荧光定量PCR(定量PCR)技术能够非常灵敏的对核酸进行定量。在研究不同细胞类型,发育阶段,和/或样品处理时,内源性参照基因的选择就至关重要。我司根据GenBank上公布的序列,通过BLAST搜索和实验验证,推出了高特异性的2对猪内源性参照基因的引物。使用此内参引物可以获得更为准确的靶基因表达结果
特点
扩增长度:70-200 bp;
引物长度:19-27核苷酸;
GC含量:40-60%;
退火温度:60°c
特异性:全部引物均通过与全mRNA RefSeq数据库BLAST比对设计并经实验验证。
应用
荧光定量PCR内参
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
雌酚酮 HPLC≥98% 20mg 犬叶酸(FA)试剂盒 Canine Folic acid,FA ELISA Kit
大风子素 HPLC≥98% 10mg 英文名称Mouse17-KSELISAKIT小鼠17-同皮质类(17-KS)规格:96T/48T
黄嘌呤 HPLC≥98% 20mg 产气荚膜梭菌肠(Closidiumperfringenscpe)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20
野鸢尾黄素 HPLC≥98% 20mg RatFreeTestoterone,F-TESTOELISA试剂盒大鼠游离睾同(F-TESTO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
刺甘草查尔酮 HPLC≥98% 20mg 小鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒 ,英文名: histon-H2b ELISA Kit
刺芒柄花苷 HPLC≥98% 20mg 小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA检测试剂盒MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit 96T/48T
刺囊酸 HPLC≥98% 20mg 人抗白色念珠菌(C.albicans)IgE抗体 试剂盒 Human Candida Albicans(C.albicans)IgE aibody ELISA Kit
刺桐碱 HPLC≥98% 20mg Rabbitansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISAKit兔转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
刺五加苷E HPLC≥98% 20mg 载玻片细胞EGFR蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
刺五加皂苷B HPLC≥98% 20mg Humanβ2-Glycoprotein1AibodyIgM,β2-GP1AbIgMELISA试剂盒人β2糖蛋白1抗体IgM(β2-GP1AbIgM)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:IL1RL1, DER4, FIT-1, IL33R, ST2, IL-1R4, Growth stimulation expressed gene 2 Human sST2(Soluble ST2) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组sST2浓度
猪 ACTB内参引物(10μM)人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:CCL3, LD78ALPHA, MIP-1-alpha, MIP1A, SCYA3, G0S19-1 Human MIP-1α(Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组MIP-1α浓度
热门标签:猪,ACTB内参引物(10μM)













