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热启动Taq DNA聚合酶Plus
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详细内容
本制品是Taq Plus经特殊工艺处理后的制品。经处理后的Taq Plus酶在热激活,其聚合酶活性被抑制,从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。本制品适用于高特异性PCR反应、Multiplex PCR、高GC含量(>60%),有二结构等有较强背景的基因组扩增的扩增和大规模基因组扩增检测。与HotStart Taq DNA聚合酶(JN0023)相比,具有扩增长度增加(简单模板可有效扩增20kb,复杂模板可有效扩增10kb),保真度好的特点。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 热启动Taq DNA聚合酶Plus | HotStart Taq Plus DNA Polymerase | 250U|250U×5 |

产品组成:
组份 JN0024-250U
HotStart Taq Plus(5U/μl) 50μl
dNTP混合液(各10mM) 200μl
5×HotStart Taq Plus Buffer with Mg2+ 2ml
产品特点:
1、简便:与常规热启动酶反应条件一致,无需改变PCR程序设置(图例一)。
2、高效:有效减少了杂带及拖带产生,从而实现高特异性的PCR。
3、灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
产品用途:
1、高特异性PCR反应;
2、复杂模板扩增;
3、Multiplex PCR;
4、基因组扩增检测;
5、大片段PCR扩增反应(可达20 kb)。
使用建议:使用本试剂扩增得到的PCR产物3′端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T载体中。
大鼠肠碱性磷酸酶(ALPI)elisa检测试剂盒
大鼠叉头框蛋白O1(FOXO1)elisa检测试剂盒
大鼠叉头框蛋白M1(FOXM1)elisa检测试剂盒
大鼠层粘连蛋白β1(LAMβ1)elisa检测试剂盒
大鼠层粘连蛋白α1(LAMα1)elisa检测试剂盒
大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)elisa分析检测试剂盒
大鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)elisa分析检测试剂盒
大鼠抗环胍氨酸肽抗体(Anti-CCP-antibody)elisa分析检测试剂盒
大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)elisa分析检测试剂盒
大鼠抗弓形虫IgM抗体elisa分析检测试剂盒
热启动Taq DNA聚合酶Plus可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒
结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒
结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒
结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒
淀粉分支酶(SBE)测试盒
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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