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详细内容
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的干燥土壤、湿泥、淤泥及海河沉淀物中提取总DNA。本产品使用安全方便,单个样品操作一般可在40分钟内完成。使用本品每克土壤可获得5μg以上的DNA,片段长度主要在20-30 kb之间。本试剂盒采用独特的溶液能够有效去除杂质和腐殖酸,通过优化的缓冲系统使裂解液中的DNA高效结合到吸附柱上,土壤中残留的杂质、PCR和酶反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤有效去除,后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 土壤基因组提取试剂盒 | Soil Genomic DNA Extraction Kit | 50次 |
自备试剂:无水乙醇,70%乙醇。
实验准备及重要注意事项:
1、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2、次使用应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PR、GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
3、使用请检查Buffer SL和Buffer GLS是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer SL和Buffer GLS于56℃水浴重新溶解。
操作步骤:
1、取0.1 g-0.3 g土壤样本,置于离心管(自备)中,加入1ml Buffer SW,涡旋振荡1-3分钟(须将管底的土壤震起来)。12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉上清。
2、加入750μl的70%乙醇,涡旋振荡1分钟(须将管底的土壤震起来),12000rpm离心1分钟,倒掉上清,用移液器将余液吸尽。
3、向沉淀中加入500μl Buffer SL,涡旋振荡1-3分钟(须将管底的土壤震起来),65℃水浴20分钟(可每隔5分钟涡旋振荡5),12000rpm离心3分钟,将上清移至新的离心管(自备)中。
4、向上清液中加等体积Buffer GLS,颠倒混匀15-25次,冰上放置5分钟。12000rpm离心5分钟。
注意:冰上放置后液体可能会凝结,属正常现象。
5、将步骤4中所得上清加入到已装入收集管的吸附柱DM中,12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:若一次不能加完溶液,可分多次转入。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer PR(使用检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-100μlBuffer GE或灭菌水,室温放置 2-5分钟, 12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
储存条件:室温(15~30℃)。
操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
人粒细胞趋化蛋白2(GCP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:CXCL6, GCP2, SCYB6, CKA-3 Human GCP-2(Granulocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组GCP-2浓度
人C肽(C-P)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:Connecting Peptide Human C-P(C-Peptide) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组C-P浓度
人褪黑素(MT)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:N-Acetyl-5-Methoxytryptamine Human MT(Melatonin) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组MT浓度。
超微量Ca2+Mg2+-ATP酶测定试剂盒(比色法) Aurantio-obtusin 中文名:橙黄决明素 分子式:C17H14O7
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超土壤基因组DNA快速提取试剂盒 Rapid exaction kit for genomic DNA in soil Panaxyne 122855-49-6 中文名: 分子式:C14H20O2
肠道病毒EV71核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T 3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid 中文名: 分子式:C19H29NO3
产品名称 Serum low-density lipoprotein (LDL) test kit Oxytetracycline 中文名:盐酸土霉素 分子式:C22H25ClN2O9
土壤基因组提取试剂盒Estradiol heptanoate 4956-37-0 中文名:庚酸雌二醇 分子式:C25H36O3 Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit兔子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Estradiol valerate 979-32-8 中文名:戊酸雌二醇 分子式:C23H32O3 豚鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Cyproterone acetate 427-51-0 中文名:醋酸环丙氯地孕酮 分子式:C24H29ClO4 Rat angiotensin conveing enzyme (ACE) ELISA Kit 大鼠紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒
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Altrenogest 850-52-2 中文名:烯丙孕素 分子式:C21H26O2 HumanCyclophosphamide,CTXELISA试剂盒人环0酰胺(CTX)ELISA试剂盒规格:96T/48T
热门标签:土壤基因组提取试剂盒













