人RNA结合基序蛋白6溶解方法:
方法1:我们的抗体(冻干粉)已经包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐剂(叠氮钠或庆大霉素),您只需要加入灭菌的双蒸水就行了。抗体溶解后,置于-20℃保存,zui好分装后使用,避免反复冻融,可bao证至少1年有效;
方法2:也可以只加入一半体积的双蒸水,再用一半体积的甘油补足,置于-20℃保存,这样抗体不会冻,有利于抗体的稳定。后续试验时,再使用对应的缓冲液稀释成工作液,即用即配。我们的抗体(冻干粉),在常温放置下,至少一个月有效;若在-20℃下保存(推荐),至少三年有效。
抗体修复方式:
方法1:沸水浴修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境,保持外部沸腾状态15min,自然冷却至室温;
方法2:微波修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中,高火5min,停火3min,中火5min,自然冷却至室温。
酶标抗体效价测定程序:各种HRP酶标记成抗体的效价测定程序如下(如:羊抗鼠IgG-HRP的效价测定):
1、抗原包板:15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔;
2、37°C包被60min或4°C过;
3、PBST洗板3次,5min/次;
4、加入倍比稀释的HRP标记抗体 0.1ml/孔;
5、37°C 30min;
6、PBST洗板5min/次×3;
7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min;
8、终止液:2N H2SO4 0.05ml/孔;
9、450nm 测定OD值;
10、阳性OD值比对照值大3倍,为判断效价稀释度。
小鼠黑色素瘤瘤株;B16
小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1
小鼠黑色素瘤细胞;B16-F1
小鼠T淋巴瘤细胞(鸡OVA基因修饰);E.G7-OVA
小鼠骨髓瘤细胞;P3/NSI/1-Ag4-1
小鼠B细胞杂交瘤细胞;W6/32
杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7B5
杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7E7
小鼠树突状细胞肉瘤低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);DG6-GFP
小鼠树突状细胞肉瘤低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);DG6-VAP33-GFP
小鼠胚胎成纤维细胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)
小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]
小鼠肺腺癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);LA1-GFP
小鼠肺腺癌低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);LA1-VAP33-GFP
小鼠胃癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);MFC-B5-GFP
C57BL/6小鼠T细胞淋巴瘤细胞;RMA
小鼠腹水瘤细胞;S-180
杂交瘤(B类);IB3C10H12A12G2H8F3
杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2F8
杂交瘤(B类);Z1510C6D10F4G6
杂交瘤(B类);Z153A2A5B3A12
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A2
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A4
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A5
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B2
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B4
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B5
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B6
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C2
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C4
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D2
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D3
tTA基因修饰的小鼠睾丸畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-1A3
tTA基因修饰的小鼠睾丸畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-3A1