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鸡新城疫血凝抑制试验抗原YS150138082LJ
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详细内容
鸡新城疫血凝抑制试验抗原、阳性血清与阴性血清说明书
【兽药名称】
通用名称:鸡新城疫血凝抑制试验抗原、阳性血清与阴性血清
商品名称:无
英文名称:Newcastle Disease Hemagglutination Inhibition Test Antigen,Positive Sera and Negative Sera
汉语拼音:Ji Xinchengyi Xueningyizhishiyan Kangyuan,Yangxingxueqing Yu Yinxingxueqing
【主要成分与含量】
抗原含有灭活的鸡新城疫病毒,血凝效价应≥1:512。阳性血清为鸡新城疫高免的SPF鸡血清,HI效价应≥1:512。阴性血清为SPF鸡血清。
【性状】
抗原为微黄色海绵状疏松团块,易与瓶壁脱离,加稀释液后迅速溶解;阳性血清和阴性血清均为微黄色海绵状疏松团块,易与瓶壁脱离,加稀释液后迅速溶解。
【作用与用途】用于血凝抑制试验检测鸡新城疫抗体。
【用法与判定】鸡新城疫血凝抑制试验抗原
1 血凝(HA)试验操作方法
1.1 在V型微量反应板中,每孔加0.025ml PBS溶液。
1.2 第1孔加入0.025ml抗原,依次作0.025ml的对倍稀释至第11孔;为精确计算血凝单位,病毒悬液开始需作一系列密集稀释,如1/3、1/4、1/5、1/6等。
1.3 每孔加0.025ml PBS溶液。
1.4 每孔加0.025ml 1%(V/V)鸡红细胞悬液。
1.5 将反应板在振荡器上振荡1~2分钟或轻叩反应板混合反应物,室温(20~25℃)静置15~30分钟或2~8℃ 45~60分钟,当对照孔的红细胞显著呈纽扣状时判定结果。
1.6 结果判定 将反应板倾斜60°,观察红细胞有无呈泪珠样流淌,完全无泪珠样流淌(100%凝集)的最高稀释倍数为血凝效价。表示1个HA单位(HAU),再根据开始的稀释倍数精确计算血凝效价。
2 血凝抑制(HI)试验操作方法
2.1 根据HA测定的效价,计算配制4个血凝单位(4HAU)抗原。
2.2 反应板中每孔加入0.025ml PBS。
2.3 第1孔中加入0.025ml血清。
2.4 在反应板上将血清做横向0.025ml的对倍稀释,至第10孔。
2.5 在第1孔至第11孔中,每孔加入0.025ml的4HAU抗原,室温下(20~25℃)静置30分钟或2~8℃ 45~60分钟。
2.6 每孔加入0.025ml 1%(V/V)的鸡红细胞悬液,轻晃混匀后,室温(20~25℃)静置20~40分钟或2~8℃ 45~60分钟,当对照孔红细胞呈显著纽扣状时判定结果。
2.7 结果判定 以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀释倍数判为该血清的HI效价。当阳性血清的HI效价与已知效价误差不超过1个滴度,阴性血清效价不高于1:4时,试验方可成立。被检样品HI效价≤1:4判为阴性;等于1:8判为可疑(可疑样品应重检,重检效价≥1:8判为阳性,<1:8判为阴性);≥1:16判为阳性。
【注意事项】鸡新城疫血凝抑制试验抗原
(1)HA和HI试验影响因素甚多,应严格控制试验条件,准确控制红细胞悬液和抗原工作浓度,同时应严格控制温度和作用时间。
(2)用pH值7.0~7.2的PBS作稀释液。
(3)抗原和阴、阳性血清若有污染,应废弃。
(4)使用时应先测抗原的血凝价,根据所测结果,配制4个血凝单位的抗原,配好后的抗原应在2小时内用完。
(5)抗原开封后2~8℃保存,应不超过3个月。切忌反复冻融。
【规格】 抗原、阳性血清和阴性血清:(1)1ml/瓶 (2)2ml/瓶
【贮藏与有效期】 2~8℃保存,抗原、阳性血清和阴性血清有效期均为24个月。
【包装】 10瓶/盒
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