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大鼠胎儿表皮角质形成层细胞培养试剂盒说明书
点击次数: 84发布时间:2026/8/7 15:00:46
- 上 传 者: 上海谷研实业有限公司
- 上传时间: 2026/8/7 15:00:46
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资料简介: 大鼠胎儿表皮角质形成层细胞培养试剂盒说明书 规格:96T/48T 特点:灵敏性高,性,吸附均匀,吸附性好,回收利用率高,是一款可以让您放心选购的抗心肌抗体IgM(HRAb IgM)酶免ELISA试剂盒产品。 使用范围:此产品供科研实验使用,不得用于临床。 用途:用于测定人血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。 具体保质期请见试剂盒外包装标签。请在保质期内使用试剂盒。联系时请提供产品货号、生产日期(见盒签),以便我们更高效为您服务。 【试剂盒特点】 1.专一性强。抗原与抗体的反应是专一反应,而酶技术以反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的反应特性并无多大差别。 2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射测定法。 3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。 4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。 5.可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行酶技术的定量测定。 6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,酶技术都能在较短时间内完成。 7.仪器和试剂简单。对没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置. 稳定性:2℃-8℃保存,有效期 6 个月。 样品收集、处理及保存方法 1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液 5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 试剂的准备 1)标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。 2)洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。 操作注意事项 1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。 5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 7)底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。 8)加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。 9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 操作步骤 1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。 2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。 3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。 4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。 5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。 6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。 7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。 8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。 9)在450nm波长处测定各孔的OD值。 局限 6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。 试剂盒性能 1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。 2. 特异性:不与其它细胞因子反应。 3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。 结果判断与分析 1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值 2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的待测物质标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的待测物质含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
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