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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

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一步免提取RT-PCR试剂盒(探针法)

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/19 9:59:10

产品摘要:一步免提取RT-PCR试剂盒(探针法)正在出售的产品:干扰素alpha 14蛋白抗体Goat Anti-Guinea IgG Whole serum 羊抗豚鼠IgG抗血清
白介素6抗体Goat Anti-rabbit IgG Whole serum 羊抗

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产品完善度: 访问次数:564

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性:
中文名称:一步免提取RT-PCR试剂盒(探针法)
英文名称:Sample Direct RT-qPCR Kit
产品规格:25μl×200次|25μl×1000次
产品货号:GOY-F10688
本制品是采用探针法进行One-Step Real-Time RT-qPCR的用试剂盒。使用时只需要加入检测目的基因所需的引物、探针及模板样品,即可快速开始反应。样品数量较多时,本制品可以直接以含有RNA病毒等的生物样品起始反应,无需进行RNA提取及纯化。由于核酸提取、反转录、qPCR各反应在同一反应管中连续进行,大大提高了操作简便性,减少了反应时间。从核酸提取(90℃)到反转录反应(55-65℃)连续进行,对于含有复杂高结构的RNA病毒等的检测也能发挥作用。cDNA合成后进行高扩增效率的PCR反应,探针发出的荧光可实时检出。
对于重复检测特定目的基因等的实验,实验环境中常混有先检测反应的扩增产物,本制品中含有能够分解带有dUTP的PCR产物的UNG酶(Uracil N-Glycosylase),持续使用本制品能够有效避免交叉污染造成的假阳性问题。
本制品对于肝素(血液)和腐殖酸(土壤)等各种阻害物质具有高耐受性,可用于从各种生物样品直接起始进行病毒及细菌检测,或基因的表达分析等应用。
保存条件:-20℃
工作原理:
1.RT-PCR
RNA虽不能直接作为PCR的模板,但是通过使用反转录酶将RNA合成cDNA,就可以利用PCR对RNA进行分析。这就是RT-PCR,是高灵敏度的RNA检测方法。本制品使用One Step RT-PCR法,其原理如下图所示。One Step RT-PCR先使用PCR用特异性引物(Reverse)进行反转录反应,然后以合成的cDNA为模板,经特异性引物(Forward,Reverse)进行PCR扩增,整个反应在同一个反应管中连续进行。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
通用型血对氧磷1(PON1)有机磷活性荧光定量检测试剂盒20次Half –Fraser 添加剂小鼠水通道3(AQP-3)Elisa测定试剂盒
细胞对氧磷1(PON1)芳香酯活性比色法定量检测试剂盒改良缓冲胨水(MBP)小鼠干扰诱导10(IP-10/CXCL10)Elisa测定试剂盒
组织对氧磷1(PON1)芳香酯活性比色法定量检测试剂盒EB增菌大鼠可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)Elisa测定试剂盒
血对氧磷1(PON1)芳香酯活性比色法定量检测试剂盒Fraser 培养大鼠巨噬集落激因子(M-CSF)Elisa测定试剂盒
细胞对氧磷1(PON1)芳香酯活性比色法定量检测试剂盒Fraser 添加剂WB 载脂D抗体流式免疫组化
组织对氧磷1(PON1)内酯活性比色法定量检测试剂盒UVM培养上皮型钙粘附分子/血管内皮钙粘抗体流式免疫组化
血对氧磷1(PON1)内酯活性比色法定量检测试剂盒UVM 添加剂1神经粘附分子1抗体流式免疫组化
细胞对氧磷2(PON2)活性比色法定量检测试剂盒LM-137琼脂原抗体流式免疫组化/抗体流式免疫组化
组织对氧磷2(PON2)活性比色法定量检测试剂盒啤酒检验系列生长激释放激因抗体流式免疫组化
细胞对氧磷3(PON3)活性比色法定量检测试剂盒MRS 琼脂础葡萄糖转运1抗体流式免疫组化
组织对氧磷3(PON3)活性比色法定量检测试剂盒UBA 培养胰岛抗体流式免疫组化
细胞对氧磷3(PON3)活性荧光定量检测试剂盒NBB 培养巨噬炎症因子1α抗体流式免疫组化
组织对氧磷3(PON3)活性荧光定量检测试剂盒Raka-Ray 培养果胶
活性定量试剂题SCDLP体培养 肌
名称规格吐温80营养琼脂 马来肼
一步免提取RT-PCR试剂盒(探针法)Jangomolide
93767-25-0
中文名: 加洁茉里苦素
别 名: Acidissimin
分子式:C26H28O8
性状:Powder
纯度:95.0%
3-Epicabraleahydroxylactone
35833⁻⁷2-8
中文名:
别 名:
分子式:C27H44O3
性状:Powder
纯度:%
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。

热门标签:一步免提取RT-PCR试剂盒(探针法)

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