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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

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耐热一步法RT-PCR试剂盒

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/19 9:59:03

产品摘要:耐热一步法RT-PCR试剂盒正在出售的产品:G蛋白γ5/Gγ5 抗体Anti-OAT-1/FITC 荧光素标记阴离子转运蛋白-1(抗大、小鼠)抗体IgG
G蛋白γ 1/Gγ 1 抗体Anti-OAT-3/FITC 荧光素标记阴离子转运蛋白-3抗体IgG$r

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试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
产品属性:
中文名称:耐热一步法RT-PCR试剂盒
英文名称:HotScript One-Step RT-PCR Kit
产品规格:50μl×50次|50μl×100次
产品货号:GOY-F10380
本试剂盒是为一步法RT-PCR实验配制的,使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录反应和PCR扩增反应。反应过程中无需打开管盖添加试剂,避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。
本试剂盒包括多点突变改造耐热的HotScript M-MuLV反转录酶、热启动Taq DNA聚合酶和RNasin、同时包含适用于反转录和PCR扩增的优化独特反应体系。
HotScript M-MuLV反转录酶的RNase H活性缺失,与M-MuLV相比,具有更的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。同时该酶可以在高达50~60℃反转录,大大提高了复杂二结构,GC含量丰富模板反转录效率,产量敏感度和特异性比一般试剂盒显著特高。
注意事项:
避免RNase污染。
为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板
不同的片段,所需佳RNA模板用量不同,过多的RNA会抑制反应,建议根据反应调整模板用量。
不能使用Oligo(dT)和Random Primer合成cDNA。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
DMEM细胞培养500毫升人正常来源胰岛样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒--动物,人
DMEM细胞培养(无红)500毫升人胚肾;293 [HEK-293]EBIgG(EBv IgG)ELISA试剂盒--动物,人
RPMI 1640细胞培养500毫升人成纤维;HFF雌三醇(E3)ELISA试剂盒--动物,人
胰(0.05%)乙二四乙混合100毫升人胚肺成纤维;MRC-5腮炎IgM ELISA试剂盒--动物,人
胰(0.25%)乙二四乙混合100毫升人皮肤成纤维;CCC-HSF-1Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)ELISA试剂盒--动物,人
乙二四乙(EDTA)细胞脱离溶100毫升人羊膜;WISHEBIgA(EBv IgA)ELISA试剂盒--动物,人
Hanks平衡盐缓冲溶(HBSS)500毫升人胚肺成纤维;CCC-HPF-1登革热抗体(DF-Ab)ELISA试剂盒--动物,人
Hanks钙镁平衡盐缓冲溶(HBSS)500毫升人胚皮肤成纤维;CCC-ESF-1小鼠血浆α颗粒膜(GMP-140)ELISA试剂盒,
Hanks钙镁平衡盐缓冲溶(HBSS)不含NaHCO3500毫升人胚胎眼巩膜成纤维;HFSFⅡ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒--动物,人
谷氨溶(100X)100毫升人胚胎眼Tenon's囊成纤维;HFTF促状(TSH)ELISA试剂盒--动物,人
10倍Hanks平衡盐缓冲溶(HBSS)500毫升人肾皮质近曲小管上皮;HK-2CBZ-L-氨
标准磷平衡盐(PBS)缓冲溶500毫升人肾小管上皮;HKC小鼠心钠肽(ANP)ELISA试剂盒,
钙镁磷平衡盐(PBS)缓冲溶500毫升人胚胎膀胱组织来源;CCC-HB-2EBIgM(EBv IgM)ELISA试剂盒--动物,人
10倍磷平衡盐(PBS)缓冲溶(0.1 M)500毫升人胚胎气管组织来源;CCC-HBE-2糖皮质激受体α(GR-α)ELISA试剂盒--动物,人
完全氨补充溶(1X)100毫升人胚肾二倍体;CCC-HEK-1小鼠胰岛样生长因子结合2(IGFBP-2)ELISA试剂盒,
耐热一步法RT-PCR试剂盒Forsythoside B
81525-13-5
中文名: 连翘酯苷B
别 名:
分子式:C34H44O19
性状:Powder
纯度:98.0%
Poliumoside
94079-81-9
中文名: 金石蚕苷
别 名:
分子式:C35H46O19
性状:Powder
纯度:98.0%

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