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真菌保存液Ⅲ
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:真菌保存液Ⅲ
英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
用途:
用于液体浸制真菌标本的制作。对于灰、白、浅黄或淡褐色真菌的保存推荐此液。
注意事项:
主要由硫酸锌、福尔马林等组成。
储存条件:室温,避光,12个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
三棕榈甘油酯 98%跨膜蛋白Sema3C抗体
三棕榈甘油酯 85%肌浆/内质网钙ATP酶2抗体
赤霉素 分析标准品信号感应增殖相关蛋白1抗体
二甘氨酰甘氨 ≥98.5% 多配体蛋白聚糖1抗体
没食子蓝 Biological stain沉默调节蛋白1抗体
鸟嘌呤盐盐 ≥99.0% (HPLC)感觉神经性耳聋常染色体隐性遗传61抗体
硝镓(III) 水合物 99.999% metals basis突触结合蛋白4抗体
反式-3-羟肉桂 99%凋亡因抗体
3-肼 99%特异表达新因5抗体
羟高铁血红素 98%溶质携带物家族-1抗体
水合肼,一水 99%丝氨/苏氨蛋白激酶17A/DAP凋亡诱导蛋白激酶1抗体
十七烷 GR,99%碳氢钠协同转运蛋白4-A7抗体
二十六烷 99%微管卷曲蛋白SYNC抗体
二十六烷 分析标准品, ≥99.5% (GC)化SH2结构含肌SHIP1抗体
5-羟吲哚 98.0%化沉默调节蛋白1抗体
真菌保存液Ⅲ通用转录因子2H肽1抗体Human DCT(L-dopachrome tautomerase) ELISA Kitβ-甘油磷酸二钠五水物
甘油激酶抗体Human TREML4 ELISA Kit戊烷磺酸钠
线粒体甘油三磷酸脱氢酶2抗体Human TRAPB/SSR2 ELISA Kit磷酸二(2-乙基己基)酯
谷氨酰合成酶/谷氨酸氨连接酶抗体Human TRAPA/SSR1 ELISA Kit乙酸正丙酯
甘油三磷酸脱氢酶1抗体Human TRADD ELISA Kit铝镍合金
神经节苷酯抗体Human TRAIP ELISA Kit西贝母碱
谷胱甘肽S转移酶A3抗体Human TPTE ELISA Kit龙胆苦苷
磷酸化GADD153抗体Human TRAK2 ELISA Kitγ-亚麻酸甲酯
热门标签:真菌,保存液Ⅲ













