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核转位分析试剂盒(单分子转位)(FM法)
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详细内容
中文名称:核转位分析试剂盒(单分子转位)(FM法)
英文名称:
产品规格:100T
发货周期:1~3天
NF-κB是一个多向性核转录调节因子,可调节细胞因子、趋化因子、粘附分子、生长因子、免疫受体、氧化应激相关酶、转录因子、急性时相蛋白等基因的表达,功能涉及相应的许多生理、病理过程。
DAPI 是一种蓝色核酸染料,优先染dsDNA,DAPI 表现为可集中结合在DNA 双链的AT 小沟,结合后的DAPI 荧光会发生20倍增强。同时,DAPI 也可以结合RNA,与DNA 不同,一般认为DAPI 结合于RNA 的AU 区。DAPI/RNA 的复合体(500nm)有比DAPI/dsDNA 复合体(460nm)更长的荧光波长。DAPI 是一种常用的多色荧光技术中的核复染剂。
NF-κβ作为一种广泛存在的转录因子,被激活由胞浆转入胞核,从而参与炎症反应、免疫反应、细胞凋亡、肿瘤发生等。可以将细胞核和NF-κβ分别用DAPI 和FITC 染色,FlowSight 可观察每个细胞是否发生NF-κβ核转位,并量化分析NFkB 核转位程度以及发生核转位细胞的比例。
储存:4℃避光,有效期12个月。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
常春藤皂苷元 分析标准品,≥98%人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)免疫试剂盒无胸腺症相关蛋白DGCR6/迪格奥尔格综合征关键因6抗体p150 CAF1 染色质组装因子1P155抗体
高三尖杉酯碱 分析标准品,≥98%人Prominin 2(PROM2)免疫试剂盒朊蛋白DPL抗体P14ARF/CDKN2A 抑癌因p16抗体
哈巴俄甙 分析标准品,≥98%人Podocin 免疫试剂盒肌强直性营养不良蛋白激酶抗体P14ARF 抑癌因p14抗体
大麦芽碱 分析标准品,≥99%人PL7抗体/抗苏氨酰tRNA合成酶(PL7)免疫试剂盒有丝分裂控制蛋白dis3抗体p107/RBL1 视网膜母瘤样蛋白p107抗体
豆腐果甙 分析标准品,≥98%人PL12抗体/抗氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)免疫试剂盒肝癌新因3蛋白抗体Oxytocin R 催产素受体(缩宫素受体)抗体
异欧胡素 分析标准品,≥99%人PC4,SFRS1互动蛋白1(PSIP1)免疫试剂盒Dapper2蛋白抗体Oxytetracycline 土霉素抗体
盐药根碱 分析标准品,≥98%人P53抗体免疫试剂盒Dapper3蛋白抗体OXSR1 氧化应激反应蛋白1抗体
党参炔苷 分析标准品,≥98%人P2蛋白抗体(IgM)免疫试剂盒背神经管核蛋白抗体ox-LDL 氧化低密度脂蛋白抗体
甘草素 分析标准品,≥98%人P2蛋白抗体(IgG)免疫试剂盒双精氨水解酶1抗体ox-LDL 氧化低密度脂蛋白抗体
蒿本内酯 分析标准品,≥90%人P27蛋白(P27)免疫试剂盒丝氨/苏氨蛋白激酶DCAMKL1抗体OXCT1 含氧辅酶A转移酶1抗体
乌药内脂 分析标准品,≥98%人P0蛋白抗体(IgM)免疫试剂盒唐氏综合征粘附分子抗体OVCA2 卵巢癌相关因2蛋白抗体
盐川芎 分析标准品,≥98%(HPLC)人P0蛋白抗体(IgG)免疫试剂盒脂酶HTPAP抗体OVCA1 卵巢癌相关因1抗体
α-倒捻子素 分析标准品,≥98%人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体(OJ/IleRS)免疫试剂盒穿膜蛋白DLK1抗体(C端)OVA/SerpinB8 鸡卵白蛋白/卵清蛋白抗体
罗汉果苷V 分析标准品,≥98%人N-乙酰-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨(AcSDKP)免疫试剂盒二氢叶还原酶样1抗体OTUB1 泛素特异性蛋白酶OTB1抗体
(-)-薄荷 分析标准品,≥99.5%人N-乙酰-β-D-氨葡萄糖苷酶(NAG)免疫试剂盒脱氧尿苷三酶DUT抗体OTUB 泛素特异性蛋白酶Otubain2抗体
核转位分析试剂盒(单分子转位)(FM法)21号染色体开放阅读框62抗体Human VACM-1(Cullin 5) ELISA KitFMOC-D-丙氨酸
磷酸化胞浆型磷脂酶A2抗体Human TSC2(Tuberous Sclerosis Protein 2) ELISA Kit2′-甲氧基尿苷
9号染色体开放阅读框46抗体Human Rbx2(RNF7) ELISA Kit天青II曙红
20号染色体开放阅读框103抗体Human CD72(B-cell differentiation antigen) ELISA Kit葡聚糖凝胶S-100 HR
9号染色体开放阅读框86抗体Human anti 21-OH Ab(anti 21-hydroxylase antibody) ELISA Kit葡聚糖T10
钙粘附分子18抗体Human Asprosin ELISA Kit人促睡眠肽(DSIP)ELISA试剂盒,DSIP ELISA kit
CD276抗体Human 8-iso-PGF2α(8-isoprostane) ELISA Kit人基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒,TIMP-3 ELISA kit
21号染色体开放阅读框25抗体Human anti-EPO antibody(anti-Erythropoietin antibody) ELISA Kit人抗核仁抗体(ANA)ELISA试剂盒, ANA ELISA kit
热门标签:核转位分析,试剂盒,单分子转位,FM法













