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淡水藻保存液Ⅰ
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:淡水藻保存液Ⅰ
英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
用途:
含有福尔马林、乙酸、乙醇等。
注意事项:
推荐用于淡水藻类的保存。此类保存液不能保色,如需保色,需用此保存液作用1-2天后转入保色液中长期保存。
储存条件:室温,避光,12个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
双十烷二溴化铵 80% 水溶胶钠协同转运蛋白抗体
2,6-二硝酚 96%精氨结合蛋白2抗体
N,N-二乙 99%唾液结合性免疫球蛋白样凝集素1抗体
N,N-二十二烷-N-氧化物 95%周期蛋白SG2N抗体
β-甘油钠 98%,五水STRN4蛋白抗体
二乙炔 99%钠离子通道蛋白7α/Na+ CP type VIIα抗体
N,N'-二脲 98%电压门控钠通道SCN3α蛋白/Na+ CP type IIIα抗体
N,N'-二脲 95%神经元电压门控钠通道蛋白β2/Na+ CP type IIβ抗体
3,4-二氢-2H-吡喃 98%红膜蛋白STOM抗体
2,2'-二羟联 99%钠依赖性脯氨转运PROT抗体
二巯 97%氨转运蛋白2抗体
3,5-二 分析标准品溶质载体蛋白家族35成员C2抗体
3,5-二 98%转绿激活蛋白SRCAP抗体
2,5-二酚 分析标准品上皮特异性ETs转录因子抗体
2,5-二酚 98%纤溶酶原激活物抑制因子2/血浆酶原激活酶抑制因子-2抗体
淡水藻保存液Ⅰ溶酶体累积病相关蛋白/口吃相关蛋白抗体Human TROVE2 ELISA KitL-天冬氨酸镁
溶酶体累积病相关蛋白/口吃相关蛋白抗体Human TROAP ELISA KitBOC-L-亮氨酸
促性腺释放2抗体Human TRPC4 ELISA Kit琼脂糖SFR
氨基葡萄糖6-硫酸酯酶抗体Human TRPC4AP ELISA Kit乙酸纤维素
高尔基体膜相关蛋白抗体Human TRPA1(Transient receptor potential cation channel subfamily A member 1) ELISA Kit葡聚糖凝胶G-200
高尔基体膜相关蛋白5抗体Human TRIM69 ELISA KitN-溴代丁二酰亚
高尔基体膜相关蛋白7抗体Human TRPC5 ELISA Kit聚乙二醇400
高尔基复合体CFR1抗体Human TRIM67 ELISA Kit脱氧胆酸钠
热门标签:淡水藻,保存液Ⅰ













