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木质素染色液(氯代亚硫酸法)
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详细内容
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中文名称:木质素染色液(氯代亚硫酸法)
英文名称:
产品规格:2×100ml
发货周期:1~3天
用途:
木质化细胞壁染色,利用氯代亚硫酸盐显色,染色后木质化的细胞壁呈亮红色
储存条件:室温,6个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
左旋肉碱 分析标准品,99%信号转导和转录激活因子7抗体
钙镁试剂 Indicator信号转导接头蛋白2抗体
3-苄 99%SLAP蛋白抗体
5--2- 99%固携带蛋白2抗体
无水醋铜 99.99% metals basis信号转导和转录激活因子5抗体
无水化钴(Ⅱ) 99.7%碳氢钠协同转运蛋白4-A4抗体
无水化铜(Ⅱ) 98%SHISA蛋白家族9抗体
无水化铜(Ⅱ) 99.99% metals basis凋亡抑制因子抗体
柠康酐 98%外纺锤体样蛋白1抗体
3-环己 99%化信号转导和转录激活因子5a抗体
环己烯 97%抗表面S蛋白抗体
环戊硫 97%突触素抗体/突触相关蛋白-1
环辛酮 97%分泌素抗体
胆固酯 98%可溶性载质转运蛋白22A17抗体
2--6-氟 98%化Src原癌因抗体
木质素染色液(氯代亚硫酸法)生长因子受体结合蛋白14抗体Human TSPAN11 ELISA Kit对苯二甲酸二甲酯
HBeAg结合蛋白4/甘油激酶抗体Human TSPAN10 ELISA Kit硫酸铝
甘酸-N-酰基转移酶样2抗体Human TSPAN2 ELISA Kit过磷酸钙
磷脂酰基蛋白聚糖2抗体Human SLC26A4(Pendrin) ELISA Kit酯蟾配基
氧化还原酶GlyR1/核蛋白60抗体Human TSPAN3 ELISA Kit秦皮乙素
神经鞘脂激活蛋白3抗体Human PPARGC1A(Peroxisome prolifeRator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha) ELISA Kit柴胡皂苷 a
甘露糖脱水酶GMDS抗体Human TRPV5 ELISA Kit断血流皂苷 A(醉鱼草皂苷 Ⅳb)
糖皮质调节元件结合蛋白1抗体Human TRPV4 ELISA Kit旱莲苷A 薄层色谱
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:木质素,染色液,氯代亚硫酸法













