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种子生活力染色液(TTC法)
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:种子生活力染色液(TTC法)
英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
用途:
TTC被广泛用于酶实验的氢受体,TTC还原量能表示脱氢酶活性,进而判断小麦、绿豆、水稻、油菜、花生等植物种子活力
注意事项:
TTC染色液渗入种胚的细胞内,被染成红色;当种胚活力下降时,呼吸作用明显减弱,脱氢酶的活性下降,胚的颜色变化不明显;当种胚无活力时,不着色,故可以由染色的程度推知种子的生命力强弱
储存条件:室温,避光,12个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
1,4-丁二二缩水甘油 60%转录因子21抗体
硫 98%(限制品)蛋白聚糖1抗体
N-(3-溴)邻二酰亚 98%蛋白聚糖2抗体
氢钡 98%SRPX2蛋白抗体
5-溴尿嘧啶 99%跨膜蛋白SEMA3D抗体
降烯 99%分化蛋白SEPT11抗体
仲丁 standard for GC, ≥99.8% (GC)晶状体发育相关蛋白Six3抗体
仲丁 99.5%,无水S100钙结合蛋白A7抗体
3,4-并芘 96%沉默调节蛋白1抗体
3,4-并芘 分析标准品S100钙结合蛋白A7抗体
3,4-并芘标准溶液 5.25μg/mL,体:淋巴管内皮和血管内皮受体1抗体
正丁 for HPLC,≥99.7% (GC) 鞭毛蛋白2抗体
SP跨膜蛋白SEMA5A抗体
异硫丁酯 99%IQCJ抗体
二 98%(剧品)SH2结构域蛋白C3抗体
种子生活力染色液(TTC法)GATA结合蛋白6抗体Human TUB ELISA Kit阿佐塞米
GLP-1单克隆抗体Human TTC32 ELISA Kit人胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)Elisa测定试剂盒
颗粒酶B抗体Human TTC39B ELISA Kit冬虫夏草LAMP鉴定试剂盒
G蛋白偶联受体30抗体Human TTC37 ELISA Kit花椒探针法PCR鉴定试剂盒
神经节苷脂诱导分化相关蛋白2抗体Human TTC35 ELISA Kit皂角染料法PCR鉴定试剂盒
3-磷酸甘油脱氢酶Human TTC39A ELISA Kit小鼠抗内皮抗体(AECA)Elisa测定试剂盒
GDNF家族受体α-1抗体Human B3GALT2(Beta-1,3-galactosyltransferase 2) ELISA Kit小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)Elisa测定试剂盒
运动神经元存活蛋白结合蛋白1抗体Human TTC26 ELISA Kit小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)Elisa测定试剂盒
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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