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甲基绿染色液(2%)
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:甲基绿染色液(2%)
英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
用途:
细胞核染色,可用于免疫组化的复染
注意事项:
染色结果为:细胞核呈绿色
储存条件:室温,避光,6个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
偶氮 97%鸟嘌呤核苷交换因子抗体
偶氮 分析标准品核糖体结合因子RBFA抗体
吖啶酮 98%环指蛋白166抗体
溴化乙酰胆碱 98%视网膜色素变性蛋白1抗体
二-2-氨乙酯 98%G蛋白结合蛋白RAB10抗体
3-氨-4-羟 97%G蛋白结合蛋白RAB11a抗体
3-氨酰 98%G蛋白结合蛋白RAB6A抗体
5-氨-1-戊 97%RAS癌因相关蛋白RAB17抗体
松香 75%G蛋白结合蛋白RAB38抗体
4-乙酰氨 99%DNA修复蛋白Rad50抗体
5-氨戊 97%RecQ解旋酶样蛋白5抗体
硫 AR,99.0%RecQ解旋酶样蛋白5抗体
蒽 96%单链结合蛋白70抗体
阿脲,一水 98%视网膜S抗原抗体
乙缩 Standard for GC,>99%(GC)受体活性修饰蛋白2抗体
甲基绿染色液(2%)谷氨酸受体红藻氨酸离子5抗体Human IDH1(IsocitRate dehydrogenase [NADP] cylasmic) ELISA Kit鱼腥草染料法PCR鉴定试剂盒
棕榈酰转移酶GODZ抗体Human UBA2 ELISA Kit人维生素D受体(VD R)Elisa测定试剂盒
G蛋白信号调节蛋白1抗体Human UBA5 ELISA Kit小鼠颗粒酶A(Gzms-A)Elisa测定试剂盒
G氨基丁酸受体β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗体Human UBA6 ELISA Kit小鼠胰岛素(INS)Elisa测定试剂盒
G蛋白α抗体Human BAI3(Brain-specific angiogenesis inhibitor 3) ELISA Kit小鼠P物质受体(SP-R)Elisa测定试剂盒
G蛋白β样蛋白抗体Human TXNDC17 ELISA Kit大鼠血管内皮生长因子C(VEGF-C)Elisa测定试剂盒
通用转录因子GTF2B抗体Human TULP1 ELISA Kit猪C反应蛋白(CRP)Elisa测定试剂盒
磷酸化gp130抗体Human TUFT1 ELISA Kit鸡乙酰乙酸检测(ACAC)Elisa测定试剂盒
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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