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甲基绿染色液(0.1%)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:甲基绿染色液(0.1%)
英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
用途:
免疫组化染色,组织切片染色
注意事项:
主要由甲基绿、乙酸盐缓冲液组成。
储存条件:室温,避光,6个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
分子筛, 5 Å 干燥剂用信号转导和转录激活因子4抗体
分子筛, 5 Å pellets, 3-5 mm活性氧簇ROS抗体
分子筛, 5 Å pellets, 2-3 mm化迁移诱导因子5抗体
13X分子筛 60-80目,气相、液相色谱柱化核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体
13X分子筛 80-100目,气相、液相色谱柱化Ras相关GTP结合蛋白抗体
13X分子筛 40-60目,气相、液相色谱柱转录因子RelB蛋白抗体
13X分子筛 干燥剂用复制因子A蛋白2
13X分子筛 3-5mm,球形化复制因子A蛋白2抗体
13X分子筛 2-3mm,球形Ras相关GTP结合蛋白抗体
6201担体 40-60目化ras因相关蛋白Rab24抗体
6201担体 60-80目化ras因相关蛋白Rab24抗体
6201担体 80-100目化G蛋白信号转导调节因子19抗体
羟乙纤维素 USP化G蛋白信号转导调节因子19抗体
4-盐盐 98%化丝氨/苏氨激酶p90RSK蛋白抗体
5-溴尿嘧啶 99%化Rad51抗体
甲基绿染色液(0.1%)G蛋白偶联受体124抗体(肿瘤血管内皮标记物)Human UCK1 ELISA Kit小鼠脱氢表雄酮(DHEA)Elisa测定试剂盒
半乳糖凝集素1抗体Human UCK2 ELISA Kit大鼠可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)Elisa测定试剂盒
α葡萄糖苷酶2抗体Human UBQLN3 ELISA Kit大鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)Elisa测定试剂盒
半乳糖凝集素7抗体Human UCRC ELISA Kit大鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)Elisa测定试剂盒
特异性囊肿病液体蛋白15抗体Human UCKL1 ELISA Kit豚鼠白介素6(IL-6)Elisa测定试剂盒
B中心相关蛋白抗体Human UCHL5 ELISA Kit鸡热休克蛋白20(HSP-20)Elisa测定试剂盒
鳞状癌增强蛋白1抗体Human CLC(Eosinophil lysophospholipase) ELISA Kit周期素E/原癌基因抗体流式组化
Gα gust抗体Human UCHL5IP ELISA Kit葡萄糖调节蛋白94抗体流式组化
热门标签:甲基绿,染色液,0.1%













