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线虫活体染色液(多色蓝法)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:线虫活体染色液(多色蓝法)
英文名称:
产品规格:50ml|100ml
发货周期:1~3天
用途:
利用根据线虫在固定时体内各器官的氢离子浓度和生理状态不同,可区分线虫和植物组织,游离的线虫经过染色后内部器官染成不同颜色,便于观察识别,主要用于观察游离线虫的染色
注意事项:
主要由次甲蓝、乙醇、蒸馏水等组成
储存条件:室温,避光,12个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
3,5-二氟 98%CASP2凋亡相关蛋白抗体
4-氟-3-硝三氟 99%DNA修复和重组蛋白RAD54B抗体
5-氟-2-硝 97%畸胎瘤癌因RAS相关病抗体
2,4-二吡啶 97%Ras-GTP酶激活蛋白3抗体
4-氨三氟 98%神经内分泌特异性蛋白抗体
3,5-二氨三氟 98%视黄脱氢酶11/型肝炎病核心蛋白抗体
苄三溴化膦 98%维相关孤儿受体β抗体
丁三化膦 98%G蛋白GTP-GDP解离激因子1抗体
丁三溴化膦 99%ras癌因家族Rab3A--Rab3D抗体
苄三化 99%鸟嘌呤核苷交换因子rasgef1a抗体
三乙硅烷 98%胰腺癌转移相关蛋白RLLM1抗体
代二膦 97%环指蛋白45/自分泌运动因子受体抗体
(3-羧)三溴化膦 98.0%维相关孤儿受体α抗体
1,3-二 99%维相关孤儿受体γ抗体
二次膦酰 98%癌因RAS相关蛋白Rab4A抗体
线虫活体染色液(多色蓝法)脊髓性肌症蛋白Gemin4抗体Human PSMB9(Proteasome subunit beta type-9) ELISA Kit小鼠γ氨基丁酸(GABA)Elisa测定试剂盒
脊髓性肌症蛋白Gemin5抗体Human UQCRB ELISA Kit小鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)Elisa测定试剂盒
脊髓性肌症蛋白Gemin7抗体Human UQCRC2 ELISA Kit小鼠脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)Elisa测定试剂盒
GTP结合丝裂原诱导T蛋白抗体Human URAT1 ELISA Kit小鼠GATA结合蛋白4(GATA4)Elisa测定试剂盒
染色体卷曲螺旋域包含蛋白1抗体Human UQCRFS1 ELISA Kit小鼠上皮中性粒活化肽78(ENA⁻⁷8/CXCL5)Elisa测定试剂盒
脊髓性肌症蛋白Gemin6抗体Human UQCRQ ELISA Kit大鼠干因子受体(SCFR)Elisa测定试剂盒
磷酸化胶质纤维酸性蛋白抗体Human URB2 ELISA Kit猪层连蛋白/板层素(LN)Elisa测定试剂盒
自主生长因子GFI1抗体Human UQCRH ELISA Kit猪二氧化酶(DAO)Elisa测定试剂盒
热门标签:线虫活体,染色液,多色蓝法













