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病毒包涵体染色液(亚甲蓝伊红法)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:病毒包涵体染色液(亚甲蓝伊红法)
英文名称:
产品规格:2×20ml|2×50ml
发货周期:1~3天
用途:
病毒包涵体染色
注意事项:
采用Man亚甲蓝伊红法,染色后包涵体成红色,细胞核呈蓝色。
储存条件:室温,避光,12个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
5-氟-2- 99%PCID2蛋白抗体AEBP1 脂肪增强结合蛋白1
4-氟苄溴 97%腺苷硫激酶1抗体AE2/SLC4A2 阴离子交换蛋白2抗体
2-氟-3-(三氟)溴 97%腺苷硫激酶2抗体Adropin 能量平衡相关蛋白抗体
4-氟-2-(三氟)溴苄 98%蛋白酶激活受体3抗体ADRB3/beta 3 Adrenergic Receptor β3肾上腺素能受体抗体
2-氟-4- 97%MAWD结合蛋白抗体ADRB2 肾上腺素能受体β2抗体(β2-AR )
2-氟-5- 97%PCID1蛋白抗体ADRB1 肾上腺素能受体β1抗体
3-氟-2- 98%PDZ结构域PDZK6蛋白抗体ADRA2 ADRA2肾上腺素能受体2抗体
3-氟-2-氧 97%吡哆激酶抗体ADRA1/ADRA1B/alpha 1 Adrenergic Receptor alpha 1肾上腺素能受体抗体
4-氟-2- 97%PDZ结构域PDZK1蛋白抗体ADORA3 腺苷受体A3抗体
4-氟-3- 98%列腺癌激活蛋白抗体ADORA2B 腺苷A2b受体抗体(神经生长因子1受体)
5-氟-2- 97%PDZ结构域PDZK4蛋白抗体ADORA1/Adenosine A1 Receptor 腺苷A1受体抗体
5-氟-2- 98%PDZ结构域PDZK7蛋白抗体ADORA1 腺苷A1A受体抗体
3-氟邻氨 98%PDZ结构域PDZK8蛋白抗体ADO 2-氨乙硫双加氧酶抗体
2-氟-3- 98%化蛋白酪氨激酶9抗体ADNP/NAP 活性依赖的神经保护肽抗体
2-氟-4- 99%过氧化还原酶5/6抗体ADM2 中介素抗体
病毒包涵体染色液(亚甲蓝伊红法)卷曲蛋白6抗体Human ZC3H4 ELISA KitDL-半胱氨酸
卷曲蛋白8抗体Human ZDHHC9 ELISA KitL-谷氨酸单钠盐
FSD1蛋白抗体Human ZDHHC7 ELISA Kit心肌黄酶
卷曲螺旋结构域蛋白10抗体Human ZBP1 ELISA Kit牛血纤维蛋白原
Prader-Willi综合征相关蛋白抗体Human ZBTB11 ELISA Kit哌拉西林
AKT相互作用蛋白蛋白抗体Human ZBTB25 ELISA Kit甲硝唑
DNA解旋酶V抗体Human YPEL5 ELISA Kit嘌呤
远端上游元件结合蛋白3抗体Human LGMN(Legumain) ELISA Kit氨基蝶呤
热门标签:病毒包涵体,染色液,亚甲蓝伊红法













