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乙型肝炎病毒染色液(Tanaka维多利亚蓝法)
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:乙型肝炎病毒染色液(Tanaka维多利亚蓝法)
英文名称:
产品规格:4×50ml
发货周期:1~3天
用途:
乙肝病毒/HBV染色
注意事项:
维多利蓝染色液比较稳定,室温可放置3-4年,并可反复使用。肝细胞内的HBsAg阳性物质呈蓝色,弹性纤维、脂褐素、肥大细胞也染蓝色,胞核呈红色。不着染胆色素。
储存条件:室温,避光,12个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
2-溴-4-氟 98%神经特异蛋白酪氨酶N5抗体ALG11 天门冬酰连接糖化11抗体
2-溴-6-氟 97%足表达蛋白/转录因子21抗体ALF/GTF2A1LF 通用转录因子IIA样因子抗体
3-溴-5-氟 98%孕激素受体抗体Aldolase C 缩酶C抗体
3',5'-双(三氟)乙酮 98%神经突触蛋白PCLO抗体Aldolase A 缩酶A抗体
2,5-双(三氟)溴 97%早老素γ分泌酶2抗体ALDOB 缩酶2抗体
2-溴-4-氟 98%泛激酶1抗体ALDH2/ALDHI 乙脱氢酶2抗体
2-溴-5-氟 98%泛激酶2抗体ALDH1L1 乙脱氢酶1蛋白家族L1抗体
2-溴-6-氟 98%泛激酶3抗体ALDH1B1 乙脱氢酶5抗体
3-溴-2-氟 98%p53调控PA26核蛋白抗体ALDH1A1 胞质乙脱氢酶1抗体
3-溴-4-氟 99%26S蛋白酶调节亚型S5a抗体ALDH16A1 乙脱氢酶16家庭A1抗体
4-溴-2-氟 99%丝氨/苏氨蛋白酶3B抗体ALDH1 乙脱氢酶1型抗体
4-溴-3-氟 98%蛋白香叶烯转移酶1α抗体albumin/AFM 人血清白蛋白抗体
5-溴-2-氟 98%泛素连接酶抗体Albumin(3F4) 人血清白蛋白单克隆抗体
2--4-氟吡啶 98%PGBD3蛋白抗体ALAS2/ALAS-E 5-氨乙酰合酶1抗体
3--2-氟吡啶 98%泛激酶4抗体ALAS1/ALAS-H 5-氨乙酰合酶1抗体
乙型肝炎病毒染色液(Tanaka维多利亚蓝法)成纤维生长因子受体1原癌基因伴侣蛋白抗体Human ZKSCAN1 ELISA Kit桃仁(桃)
钙粘蛋白家族成员7抗体Human ZC3HC1 ELISA Kit骨碎补
Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白2/5抗体Human ZCCHC11 ELISA Kit半枝莲
细丝蛋白A抗体Human ZFP36L2 ELISA Kit广枣
磷酸化细丝蛋白A抗体Human ZFP64 ELISA Kit黄柏
磷酸化细丝蛋白A抗体Human ZNF703 ELISA Kit葡萄糖酸锑钠
DNA损伤修复基因XRCC9抗体Human MCPIP(Monocyte Chemoattractant Protein-induced Protein 1) ELISA Kit格列本脲
磷酸化细丝蛋白A抗体Human ZNF711 ELISA Kit尼莫地平
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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