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Warthin-Starry银染色液
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详细内容
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:Warthin-Starry银染色液
英文名称:
产品规格:2×50ml
发货周期:1~3天
用途:
螺旋体、幽门螺旋杆菌、真菌、球菌等染色
注意事项:
菌丝及颗粒呈黑色,背景呈棕黄色。染片不易腿色。
储存条件:4℃,避光,3个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
4-氨-3-(三氟) 98%T淋巴凋亡相关蛋白TDAG51抗体AMIGO1 粘附分子IgG样结构域蛋白1抗体
3-氨-4-三氟 98%蛋白酶调解因子9抗体AMID/AIFM2 线粒体凋亡诱导因子2抗体
4-氨-2-氟三氟 97%胰腺激素抗体AMH/MIS Muellerian缪勒管激素抑制因子抗体
2-氨-4,5-二氟 98%纤溶酶相关蛋白B2抗体AMFR/Gp78/RNF45 环指蛋白45/自分泌运动因子受体抗体
4-氨-2-氟 98%多聚合酶α/β/γ抗体AMBRA1 自噬相关因AMBRA1抗体
5-氨-2-氟 99%含脯氨突触相关蛋白相互作用蛋白1抗体AMBP/Alpha 1 microglobulin α1微球蛋白抗体
4-溴-2-(三氟氧) 98%外周蛋白2抗体AMACR/P504S α-酰辅酶A消旋酶抗体
2-溴-3-氟吡啶 98%区带蛋白PZP抗体ALT1 谷氨氨转移酶1抗体
2-溴-4-氟吡啶 96%蛋白香叶烯转移酶1β(FTβ)抗体ALS2CR8 肌侧索硬化2染色体区域候选蛋白8抗体
2-溴-6-氟吡啶 98%原钙粘蛋白15抗体ALS2CR4 肌侧索硬化症相关蛋白4抗体
3-溴-5-(三氟)吡啶 97%原钙粘蛋白β2抗体ALR 肝再生增强因子抗体
2-溴-5-氟-3-吡啶 97%原钙粘蛋白β4抗体ALPK3 α蛋白激酶3抗体(心肌)
4-溴-3-(三氟) 98%原钙粘蛋白γ10抗体Alpha-Synuclein/Syn/SNCA 核突触蛋白α抗体
5-溴-2-氟三氟 98%原钙粘蛋白γA4抗体alpha-Synuclein(NT) 核突触蛋白-α抗体(N端)
2-溴-5-硝三氟 98%原钙粘蛋白γA2抗体alpha-L-arabinofuranosidase 果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗体
Warthin-Starry银染色液FAM70A蛋白抗体Human ZNF146 ELISA Kit囊性纤维化跨膜转运调节因子抗体流式组化
含纤维蛋白原C结构域蛋白1抗体Human ZMPSTE24 ELISA Kit丝裂原活化蛋白激酶3抗体流式组化
F-box蛋白相关蛋白6抗体Human ZFYVE16 ELISA Kit丝裂原活化蛋白激酶激酶2抗体流式组化
磷酸化成纤维生长因子受体底物2抗体Human ZFYVE19 ELISA Kit色氨酸羟化酶抗体流式组化
椎骨蛋白2抗体Human ZMYND10 ELISA KitSDS-PAGE蛋白质中分子量
凝血因子VIIHuman ZMYND12 ELISA Kit青霉素链霉素两性霉素B溶液
凝血因子10抗体Human ZFYVE27 ELISA Kit二苯基羰酰二肼
脆性X综合征相关蛋白AFF2抗体Human ZFYVE28 ELISA KitDEAE纤维素DE-23
热门标签:Warthin-Starry银,染色液













