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鞭毛染色液(改良Ryu法)
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详细内容
中文名称:鞭毛染色液(改良Ryu法)
英文名称:
产品规格:50ml|100ml
发货周期:1~3天
用途:
鞭毛染色
注意事项:
主要由苯酚、鞣酸、硫酸铝钾、结晶紫等组成,染色后菌体和鞭毛呈紫色,菌体染色较深。
储存条件:室温,避光,12个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
罗丹宁 用于光谱测定没食子,≥99.0% (HPLC)原钙粘附蛋白α4抗体ASMTY/HIOMT 松果体N乙酰羟色抗体
锌 Anhydrous 原钙粘附蛋白α5抗体ASMTL ASMTL蛋白抗体
1-苄哌 97%原钙粘附蛋白α9抗体ASM/Acid sphingomyelinase 性神经鞘脂酶抗体
2,2'-双(三氟)二氨联 98.0%原钙粘附蛋白α7抗体ASIC1/BNaC2 敏感离子通道1抗体
2,6-二磺酰 97%原钙粘附蛋白α8抗体ASH1L ASH1蛋白抗体
1-(2-氧乙)哌 98%丝氨蛋白酶10抗体ASGPR1/ASGR1 唾液糖蛋白受体1抗体
1-(3-三氟)哌 98%原钙粘蛋白12抗体ASF1A 衰老相关蛋白ASF1A抗体
十二烷化铵 99%列腺性酶抗体ASC2/POP1 感染性蛋白蛋白1抗体
双十二烷二溴化铵 98.0%缺陷性分配同源物α抗体ASBT/SLC10A2 顶膜钠依赖性胆盐转运体蛋白抗体
双十六烷二溴化铵 97%原钙粘蛋白1抗体ASB9 含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族9抗体
二双十八烷化铵 97%造血干抗原CD133相关蛋白抗体ASB8 含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族8抗体
十六烷化铵 97%酪氨蛋白激酶6/肿瘤激酶抗体ASB7 含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族7抗体
十六烷溴化铵 99%表观抑制因子Polycomb家族成员PCGFl蛋白抗体ASB5 含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族5抗体
三辛化铵 97%原钙粘蛋白介导的PCDHαC2受体抗体ASB4 含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族4抗体
三丁化铵 75 wt. % in H2O小鼠抗p21激活激酶4抗体ASB3 锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体
鞭毛染色液(改良Ryu法)FBXL17蛋白抗体Human ZNF750 ELISA Kit鸡促黄体(LH)Elisa测定试剂盒
FCHSD1蛋白抗体Human MTRR (Methionine synthase reductase) ELISA KIT血管紧张素Ⅱ-1型受体抗体流式组化
FBXL5蛋白抗体Human ACTL9 (Actin-like protein 9) ELISA KIT活化白粘附分子抗体流式组化
FBXL12蛋白抗体Human PGLS (6-phosphogluconolactonase) ELISA KITDNA甲基转移酶-3α抗体流式组化
FBXL3蛋白抗体Human PFKFB1 (6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase 1) ELISA KITkappa型受体抗体流式组化
F-box蛋白相关蛋白11抗体Human DHCR7 (7-dehydrocholesterol reductase) ELISA KIT神经纤毛蛋白-1抗体流式组化
FGFR1癌基因伴侣蛋白2抗体Human AAK1(AP2-associated protein kinase 1) ELISA Kit“扑克蒙”蛋白又称“波克曼”蛋白抗体流式组化
成纤维生长因子受体底物2抗体Human ALPP(Alkaline phosphatase, placental type) ELISA Kit抵抗素抗体流式组化
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