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瑞氏染色液(Wright stain,即用型)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:瑞氏染色液(Wright stain,即用型)
英文名称:
产品规格:100ml|500ml
发货周期:1~3天
用途:
适用于细胞涂片、细菌等染色
注意事项:
细胞质呈红色,细胞核及细菌呈蓝色,嗜酸性颗粒呈橘红色。不含磷酸盐溶液,直接使用。
储存条件:室温,24个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
柱层层析硅胶 60目以上 280um神经母瘤蛋白PHOX2B抗体BNIP3L 促凋亡BNIP3L蛋白抗体
柱层层析硅胶 40-80目 180-450um周期蛋白依赖性激酶5激活因子1抗体BNIP3 促凋亡调节蛋白BNIP3抗体
柱层层析硅胶 80-100目 150-180um肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚5抗体BNIP2 Bcl2相互作用蛋白2抗体
柱层层析硅胶 80-120目 120-180um浦肯野相关蛋白1抗体BNIP1/TRG8 Bcl2相互作用蛋白1抗体(转化相关因8蛋白)
柱层层析硅胶 100-160目 97-150um凋亡诱导受体PLEKHG5抗体BNC2/Basonuclin 2 碱性核蛋白2(锌指蛋白basonuclin2)抗体
柱层层析硅胶 100-200目 75-150um蛋白质酶2A-B55抗体BNC1/Basonuclin 1 碱性核蛋白1/锌指蛋白basonuclin抗体
柱层层析硅胶 160-200目 75-98um棕榈酰蛋白水解酶2抗体BMPR2 骨形态发生蛋白2受体抗体
柱层层析硅胶 200-300目 54⁻⁷5um多谷氨酰结合蛋白1抗体BMPR1B 骨形态发生蛋白受体1B抗体
柱层层析硅胶 300-400目 37-54um猪蓝耳病病抗体BMPR1A/CD292 骨成型蛋白受体1A抗体
柱层层析硅胶 400-800目 15-31um对氧酶3抗体BMPER BMP内皮调节蛋白抗体
薄层层析硅胶板 25×100mm G型号 70片/盒蛋白质精氨亚型2抗体BMP9 骨形态发生蛋白9抗体
薄层层析硅胶 G60乙转移酶2抗体BMP8 骨形态发生蛋白8抗体
薄层层析硅胶 GF254 60脂酰肌结合网格蛋白组装蛋白抗体BMP7 骨形态发生蛋白7抗体
二氧化钛 CP,98.0%丝氨/苏氨蛋白酶1调节亚10抗体BMP6 骨形态发生蛋白6抗体
二氧化钛 EP,平均粒径:0.2-0.4μm 色素氧化酶装配因子PET112抗体BMP5 骨形态发生蛋白5抗体
瑞氏染色液(Wright stain,即用型)FAM55D蛋白抗体Human CPPED1 (Serine/threonine-protein phosphatase CPPED1) ELISA KIT山梨酸
组织激活过氧化酶活化增生受体γ蛋白抗体Human CADPS (Calcium-dependent secretion activator 1) ELISA KIT苏丹Ⅱ
FAM21C蛋白抗体Human BOK (Bcl-2-related ovarian killer protein) ELISA KIT苏丹红7B
FAM13C1蛋白抗体Human BRAP (BRCA1-associated protein) ELISA KIT1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亚
FAM59B蛋白抗体Human BCAR3 (Breast cancer anti-estrogen resistance protein 3) ELISA KIT多聚磷酸钠
FAM59A蛋白抗体Human BFSP1 (Filensin) ELISA KIT肉豆蔻酸异丙酯
FAM160B1蛋白抗体Human BSCL2 (Seipin) ELISA KIT氧化铝
FAM161B蛋白抗体Human BRI3BP (BRI3-binding protein) ELISA KIT马钱苷酸
热门标签:瑞氏,染色液,Wright,stain,即用型













