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磷脂铁苏木素(FeH)染色液
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:磷脂铁苏木素(FeH)染色液
英文名称:
产品规格:3×100ml
发货周期:1~3天
用途:
神经鞘磷脂染色,适用于恒冷组织切片和冰冻切片
注意事项:
属于三价铁苏木素染色法,不易长期保存,有机溶剂脱脂后染色效果才佳。
储存条件:室温,避光,6个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
邻二二壬酯(异构体的混和物) 97%激活激酶PAK7抗体BTNL3 嗜脂蛋白样3抗体
邻二二壬酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)孕激素诱导阻断因子抗体BTNL2 嗜脂蛋白样2抗体
邻二二壬酯 分析标准品增殖核抗原抗体BTN2A2 嗜脂蛋白亚家族2成员A2抗体
邻二二异壬酯 分析标准品,99.5%增殖核抗原抗体BTK/ATK 蛋白酪氨激酶ATK抗体
邻二二异壬酯 99%piwi样1蛋白抗体BTG4 B迁移因4抗体
异辛 >99.0%(GC)血小板源性生长因子A抗体BTG3 高表达神经上皮蛋白BTG3抗体
偏三三辛酯 97%泌素抗体BTG2/TIS21 B迁移因2抗体
N-叔丁氧羰-去托品酮 98%血小板源性生长因子-B抗体BTG1 B迁移因1抗体
N-苄托品酮 97%血小板源性生长因子受体A抗体(PDGFRα)BTF/BCLAF1 Bcl2相关转录因子抗体
18-冠-6 99%血小板源性生长因子受体B抗体(PDGFRβ)BTBD7 BTB/POZ结构域蛋白7抗体
15-冠-5 97%酮脱氢酶激酶4抗体BTBD6 BTBD6蛋白抗体
3-乙氧酰磺盐 98%色素上皮源性因子抗体BTBD3 BTB/POZ结构域蛋白3抗体
2(5H)-呋喃酮 98%肝癌高表达因抗体BTBD19 BTB/POZ结构域蛋白19抗体
(S)-(-)-β-羟- 96%肠道肽转运蛋白1/小肽转运蛋白1抗体BTBD17 BTB/POZ结构域蛋白17抗体
(S)-3-羟四 98%肠道肽转运蛋白2抗体BTBD10 BTB/POZ结构域蛋白10抗体
磷脂铁苏木素(FeH)染色液叉头蛋白P3抗体Human CCIN (Calicin) ELISA KIT杏叶防风
成纤维生长因子8抗体Human CAMSAP1 (Calmodulin-regulated spectrin-associated protein 1) ELISA KIT苯
肌动蛋白结合蛋白Fascin抗体Human AP1M1(AP-1 complex subunit mu-1) ELISA Kit氢氯噻嗪
线粒体裂变1蛋白抗体Human COMTD1 (Catechol O-methyltransferase domain-containing protein 1) ELISA KIT奥美拉唑
叉头蛋白P1抗体Human CASQ1 (Calsequestrin-1) ELISA KIT盐酸非那吡啶
鼠疫F1蛋白/鼠疫耶尔森氏荚膜抗原F1单克隆抗体Human CTNND1 (Catenin delta-1) ELISA KIT二甲氧苄啶
纤维母生长因子5抗体Human CTCF (Transcriptional repressor CTCF) ELISA KIT炙黄芪LAMP鉴定试剂盒
脆性X综合征相关蛋白AFF1抗体Human CTNNBIP1 (Beta-catenin-interacting protein 1) ELISA KIT紫苏叶LAMP鉴定试剂盒
热门标签:磷脂铁苏木素,FeH,染色液













