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神经HRP示踪显色液(DAB法)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:神经HRP示踪显色液(DAB法)
英文名称:
产品规格:50T
发货周期:1~3天
用途:
神经HRP示踪DAB(四甲基联)显色。
注意事项:
主要由DAB孵育液、、乙酸钠缓冲液等组成,染色后呈棕色。
储存条件:-20℃,避光,12个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
天然辣椒碱 Nature,≥95% (HPLC)鸡新城疫疫苗(鸡瘟4型混合病)抗体Calsequestrin 肌钙集蛋白/收钙素抗体
氟化铝 99.9% metals basis神经外营养蛋白1抗体Calretinin/CA 钙结合蛋白抗体
氟化铝,三水 AR,98%神经源性神经营养因子抗体Calreticulin 钙网蛋白抗体
氧化镁 AR,98.0%神经内分泌转化酶2抗体Calponin 1/COLP 钙调节蛋白-1抗体
氟化镁 AR,97.5% 神经肽W抗体Calponin 1/2/3 钙结合蛋白Calponin抗体
硝锶 99.99% metals basis神经肽Y受体5抗体Calpastatin 钙蛋白酶抑制蛋白抗体
碳锶 CP,97%神经肽Y受体4抗体Calpain 2 钙激活的中性蛋白酶2抗体
碳锶 99.995% metals basis螺旋环螺旋蛋白1+2抗体Calpain 12 钙激活蛋白酶12抗体
氟化锶 99.99% metals basis胚胎神经NNAT抗体Calpain 1 钙蛋白酶1抗体
氟化锶 CP,98%NUDCD3蛋白抗体Calmodulin/CaM I 钙调节素抗体(钙调蛋白/钙调素)
氢锶 荧光,99%CD244自然杀伤受体2B4抗体Caldesmon 钙介质素抗体
氢锶 99.98% metals basis化核因子活化T胞浆蛋白2抗体Calcium Sensing Receptor/CaSR 钙敏感受体1抗体
5-降烯-2- 98%壬酚抗体Calcitonin 降钙素抗体
2--1,3-二咪唑六氟盐 98%神经肿瘤Nova2抗原抗体Calcitonin 降钙素抗体
三氟磺镝 98%类固受体激活蛋白3抗体Calcineurin A/PP-2B alpha 1 钙调酶抗体
神经HRP示踪显色液(DAB法)凝血因子5抗体Human DCK (Deoxycytidine kinase) ELISA KITN-叔丁氧羰基-D-丙氨酸
成纤维生长因子10抗体Human CDH7(Cadherin⁻⁷) ELISA Kit人可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFαR)ELISA试剂盒,
XIAP相关因子1凋亡抑制蛋白抗体Human DGUOK (Deoxyguanosine kinase, mitochondrial) ELISA KIT人干因子/肥大生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒,
羊抗人纤维蛋白原抗体Human MTRNR2L6(Humanin-like protein 6) ELISA Kit人腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒,
Fas活化激酶结构域蛋白5抗体Human DAAM2 (Disheveled-associated activator of morphogenesis 2) ELISA KIT人游离β绒毛膜促性腺(f-βhCG)ELISA试剂盒,f-βhCG ELISA
F-box蛋白38抗体Human DOHH (Deoxyhypusine hydroxylase) ELISA KIT小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA试剂盒,
FK506结合蛋白38抗体Human PVALB(Parvalbumin alpha) ELISA Kit激肽释放酶6(KLK 6)ELISA酶联吸附试剂盒--卖
Fas活化激酶结构域蛋白2抗体Human DERA (Deoxyribose-phosphate aldolase) ELISA KITSS 琼脂
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