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尼氏染色液(甲基紫法)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:尼氏染色液(甲基紫法)
英文名称:
产品规格:2×50ml
发货周期:1~3天
用途:
尼氏物质、神经元染色
注意事项:
主要由甲基紫染色液、分化液等组成。尼氏物质呈紫黑蓝色,神经元呈淡紫蓝色,细胞核呈紫蓝色。
储存条件:室温,避光,12个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
四氧化三钴 30nm 球形,99.5%谷氨受体2C抗体CCDC116 卷曲螺旋结构域蛋白116抗体
氧化镝 40nm 球形,99.5%酪氨激酶B抗体CCDC114 卷曲螺旋结构域蛋白114抗体
纳米三氧化二铁(α- Fe2O 30nm 球形,99.5%,α型NADPH氧化酶4抗体CCDC112/MBC1 膀胱癌突变蛋白1抗体
纳米三氧化二铁(α- Fe2O 98%,30nm 球形,α型核分布因E同源蛋白1抗体CCDC11 卷曲螺旋结构域蛋白11抗体
纳米磁性氧化铁(γ-Fe2O3 20nm 球形,99.5%,γ型丝氨/苏氨蛋白激酶NEK9抗体CCDC107 卷曲螺旋结构域蛋白107抗体
四氧化三铁 99%化丝氨/苏氨蛋白激酶NEK9抗体CCDC106 卷曲螺旋结构域蛋白106抗体
四氧化三铁 97%多调控因子1抗体CCDC104 卷曲螺旋结构域蛋白104抗体
四氧化三铁 99.99% metals basis新型核蛋白质1抗体CCDC102B 卷曲螺旋结构域蛋白102B抗体
球型四氧化三铁磁粉 100-300nm核仁蛋白3抗体CCBE1 胶原蛋白和钙结合表皮生长因子结构域1抗体
纳米四氧化三铁 99.5%,20nm 球形核孔蛋白1抗体CCAP/Cardioactive Peptide 心动加速蛋白多肽抗体
纳米四氧化三铁 99%,20nm 球形NADPH氧化酶4抗体CC85C 卷曲螺旋域蛋白质85C抗体
纳米铁镍 30nm 球形 纯度>99.5%脂肪分化因子24CC16/CCSP 克拉拉蛋白抗体
纳米氧化镁 50nm,球形,99.9% metals basis肌动蛋白结合蛋白Z盘状蛋白抗体Cbx8 染色质结合蛋白Cbx8抗体
氧化钕 40nm 球形,99.5%活化T核因子5蛋白抗体CBX1/HP1 β 异染色体同源蛋白1抗体
氧化镍 30nm 球形,99.5%化活化T核因子5蛋白抗体CBP/p300 CREB结合蛋白抗体
尼氏染色液(甲基紫法)上皮特异性转录因子1抗体Human DSCAML1 (Down syndrome cell adhesion molecule-like protein 1 homolog) ELISA KIT氧化铒
内皮素2抗体Human EDA2R (Tumor necrosis factor receptor superfamily member 27) ELISA KIT生长释放因子(GH-RF)ELISA试剂盒--动物,人
内皮受体蛋白酪氨酸激酶B3抗体Human DPP9(Dipeptidyl peptidase 9) ELISA Kit特价球显色培养基
软骨外胚层发育不良相关蛋白抗体Human DYDC2 (DPY30 domain-containing protein 2) ELISA KITTSA 琼脂
髓鞘蛋白P0样蛋白2抗体Human EPS8L3 (Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 3) ELISA KIT抗 生素检定培养基1号(低PH) 用于磺苄青霉素效价测定
雌受体α抗体Human EPC1 (Enhancer of polycomb homolog 1) ELISA KITD-缬氨酰-L-白氨酰-L-赖氨酸对
内质网核信号转导蛋白2抗体Human ERAS (GTPase ERas) ELISA KITM-MLV反转录酶
锌指蛋白521抗体Human ENOSF1 (Mitochondrial enolase superfamily member 1) ELISA KIT葡萄糖酸镁
热门标签:尼氏,染色液,甲基紫法













