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髓鞘染色液(丽春红G法)
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:髓鞘染色液(丽春红G法)
英文名称:
产品规格:4×50ml
发货周期:1~3天
用途:
丽春红G和亮绿SF联合染色法
注意事项:
染色结果为:髓鞘呈红色,轴索、神经束衣和神经内衣呈绿色。
储存条件:室温,避光,12个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
1,4-二(反式+顺式) 97%指(趾)关节粘连NOG蛋白抗体CCDC70 卷曲螺旋结构域蛋白70抗体
正丁 GR(剧品)核小体结合蛋白1抗体CCDC7 卷曲螺旋结构域蛋白7抗体
胞嘧啶 98%轴突蛋白1(Neurexin 1α)抗体CCDC69 卷曲螺旋结构域蛋白69抗体
环 98%神经损伤诱导蛋白1抗体CCDC68/se57-1 卷曲螺旋结构域蛋白68抗体(皮肤T淋巴淋巴瘤相关抗原)
环 ≥99.5% (GC)神经损伤诱导蛋白2抗体CCDC67 卷曲螺旋结构域蛋白67抗体
环酮 98%丝氨/苏氨蛋白激酶Nek3抗体CCDC65 卷曲螺旋结构域蛋白65抗体
5--2-戊酮 96%中心体相关蛋白激酶Nek2抗体CCDC63 卷曲螺旋结构域蛋白63抗体
环乙炔 99%神经颗粒素抗体CCDC61 卷曲螺旋结构域蛋白61抗体
(R)4--3-羟丁乙酯 95%神经肽S抗体CCDC60 卷曲螺旋结构域蛋白60抗体
(S)-4--3-羟丁乙酯 96%神经肽S抗体CCDC6 卷曲螺旋结构域蛋白6抗体(状状腺癌编码蛋白)
4-丁酯 98%神经肽S受体1/G蛋白偶联受体154抗体CCDC58 卷曲螺旋结构域蛋白58抗体
3,3-二-1-丁炔 95%G蛋白偶联受体66/神经调节肽U受体1抗体CCDC56 卷曲螺旋结构域蛋白56抗体
2,3-二 99%G蛋白偶联受体FM4/神经调节肽U受体2抗体CCDC54/NYD-SP17 卷曲螺旋结构域蛋白54抗体
双环酮 95%神经肽S抗体CCDC52 卷曲螺旋结构域蛋白52抗体
1,2-二烷 99%肾上腺发育不全相关蛋白抗体CCDC51 卷曲螺旋结构域蛋白51抗体
髓鞘染色液(丽春红G法)磷酸化雌受体α抗体Human FCHSD2 (F-BAR and double SH3 domains protein 2) ELISA KIT秋水仙
磷酸化真核翻译起始因子4B抗体Human SLC30A3(Zinc transporter 3) ELISA Kit6-磷酸葡萄糖钡盐
真核翻译起始因子4B抗体Human EWSR1 (RNA-binding protein EWS) ELISA KIT2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸
磷酸化转录接头蛋白EP300抗体Human EXO5 (Exonuclease V) ELISA KIT2-氨基-5-萘酚⁻⁷-磺酸
磷酸化上皮癌转化蛋白2抗体Human FCHO1 (F-BAR domain only protein 1) ELISA KIT2,2-二羟基二硫代-6,6-联萘
磷酸化真核翻译起始因子4G抗体Human FCHO2 (F-BAR domain only protein 2) ELISA KIT人可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒, Sam ELISA kit
表皮生长因子受体5抗体Human EXTL1 (Exostosin-like 1) ELISA KIT人巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒,
电子转移黄素蛋白β肽/黄素蛋白抗体Human FERMT1 (Fermitin family homolog 1) ELISA KIT人丙二醛(MDA)ELISA试剂盒,MDA ELISA kit
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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