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酸性乙醇分化液(1%)
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详细内容
中文名称:酸性乙醇分化液(1%)
英文名称:
产品规格:500ml
发货周期:1~3天
用途:
苏木素染色或其他染色后的分化夜
注意事项:
苏木素染色2-5
储存条件:室温,24个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
变色硅胶 LR神经特异性转录因子DPF1抗体CD36L1/SRB1/HDL-R 高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗体
1,4-萘醌 95%N-乙酰转移酶8抗体CD36/PAS-4 CD36抗体
铵 AR,97%N-乙酰转移酶8B抗体CD34 CD34抗体
DL-2,4-二氨丁. 98%NOMO蛋白抗体CD34 CD34抗体
磺酐 98%钠离子转运蛋白1抗体CD33L/OBBP1 CD33L抗体
磺酰 99.5%(剧品)钠离子/氢离子交换蛋白3抗体CD337/NKp30/NCR3 性受体NK-p30抗体
洛伐他汀 98%化钠离子/氢离子交换蛋白3抗体CD336/NKp44/NCR2 性受体NK-p44抗体
美伐他汀 95%神经穿透素2抗体CD335/NKp46/NCR1 性受体NK-p46抗体
普伐他汀 98%脑啡肽酶2抗体CD33/Siglec-3 CD33抗体
1,4,7,10-四氮杂环十二烷 97%A型流感病核蛋白抗体CD33/Siglec-3 CD33抗体
乙二四乙二钠锰 AR,95%神经粘附分子2抗体CD33/Siglec-3 CD33抗体
乙二四乙二钠钙 AR巢蛋白1抗体CD329/SIGLEC8 CD329抗体
1,4,7,10-四氮杂环十二烷 97%痛觉调节肽NPFF抗体CD328/Siglec⁻⁷ 唾液结合性免疫球蛋白样凝集素7抗体
过氧化氢溶液(30%) AR神经紧张素抗体CD31/PECAM-1 血小板内皮黏附分子-1抗体
过氧化氢溶液(30%) GR鼻咽上皮特异性蛋白1抗体CD31/PECAM-1 血小板内皮黏附分子-1抗体
酸性乙醇分化液(1%)EB病核抗原1抗体Human GFOD1 (Glucose-fructose oxidoreductase domain-containing protein 1) ELISA KIT人趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒,
磷酸化雌受体β抗体Human GBGT1 (Globoside alpha-1,3-N-acetylgalactosaminyltransferase 1) ELISA KIT人碱性成纤维生长因子(bFGF)ELISA试剂盒,
磷酸化4E结合蛋白1抗体Human LGALSL (Galectin-related protein) ELISA KIT人单核趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA试剂盒,
磷酸化4E结合蛋白1,2,3抗体Human GPR37L1 (Prosaposin receptor GPR37L1) ELISA KIT人美丽线虫凋亡基因(CED-3)ELISA试剂盒, CED-3 ELISA kit
Epsin2B蛋白抗体Human GLMN (Glomulin) ELISA KIT人胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒,
表皮生长因子抗体Human GPR65 (Psychosine receptor) ELISA KIT绵羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒,
表皮生长因子样蛋白8抗体Human ARHGAP35 (Rho GTPase-activating protein 35) ELISA KITTSN 琼脂用于产气荚膜梭的平板计数(Merck方法)
E3泛素连接酶抗体Human GFOD1 (Glucose-fructose oxidoreductase domain-containing protein 1) ELISA KITL-半胱氨酸盐酸盐无水物
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