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乳酸脱氢酶染色液(H型,四唑盐法)
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详细内容
中文名称:乳酸脱氢酶染色液(H型,四唑盐法)
英文名称:
产品规格:2×50ml
发货周期:1~3天
用途:
乳酸脱氢酶染色,主要显示H型(LDH1)
注意事项:
主要由四氮唑蓝孵育液、阴性对照组成。染色后酶活性部位呈蓝紫色沉淀。
储存条件:4℃,避光,6个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
Mw 400,000-500,000 ,20 wt. %水溶液,800-1000 cP (25 °C) 肌增强因子2B抗体CREPT 肿瘤高表达周期相关蛋白抗体
三月桂 95%心血管发育中胚层相关蛋白1抗体CREM 环腺苷反应元件调节蛋白抗体
三辛 90%转移相关蛋白2抗体CRELD2 富含半胱氨与表皮生长因子样蛋白2抗体
十四 96%MYC结合蛋白2抗体C-REL 淋巴衍生C-型凝集素抗体
钛钡 粉末, <2 μm, 99.5% metals basis精氨/脯氨富含卷曲蛋白1抗体CREG2 E1A激活因激蛋白2抗体
钛钡 99.99% metals basis微管相关蛋白9抗体CREG1 E1A激活因激蛋白1抗体
纳米钛钡 99.9% metals basis,<100 nm有丝分裂驱动蛋白样1抗体CREB-H/CREB3L3 环腺苷应答元件结合蛋白H抗体
D-木糖 98%髓过氧化物酶抗中性粒胞质IgG抗体CREB-1 环腺苷应答元件结合蛋白抗体
异烟 AR,99%兔抗小鼠IgA抗体CREB-1 环腺苷应答元件结合蛋白抗体
醋锑 97%氨蛋白激酶C底物Marcks抗体Creatine Kinase MM 肌激酶M型抗体
乙钴,四水 ACS肠道分化干MATH-1蛋白抗体CRCT1 富含半胱氨C端蛋白1抗体
氢 ACS,48%化丝裂原活化蛋白激酶MKK7抗体c-Raf/Raf1 癌因c-Raf抗体
氢 48 wt. % in H2O, ≥99.99%化丝裂原活化蛋白激酶MKK6抗体CRABP2 维结合蛋白2抗体
单 50%水溶液,含0.1 %稳定剂化丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体CR1/CD35 Ⅰ型补体受体抗体(C3b/C4b受体抗体)
偶酰 98%单克隆抗体CQ028 多癌因下调蛋白抗体
乳酸脱氢酶染色液(H型,四唑盐法)EB病核抗原-3B抗体Human MTMR1 (Myotubularin-related protein 1) ELISA KIT3,3,-二氨基联苯片剂
磷酸化驱动蛋白样蛋白1抗体Human NEIL3 (Endonuclease 8-like 3) ELISA KIT微量可调八道移液器P10
乙酰基转移酶EID1抗体Human NAALAD2 (N-acetylated-alpha-linked acidic dipeptidase 2) ELISA KIT硅胶60G
微管相关蛋白EB家族3抗体Human MAP3K1 (Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 1) ELISA KIT1,6-己二醇
真核翻译起始因子5抗体Human MINPP1 (Multiple inositol polyphosphate phosphatase 1) ELISA KIT间苯二酚
遗传性列腺癌蛋白2抗体Human NIFK (MKI67 FHA domain-interacting nucleolar phosphoprotein) ELISA KIT肉桂酸
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体Human MRVI1 (Protein MRVI1) ELISA KIT人二组织趋化因子(SLC/CCL21)ELISA试剂盒,
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体Human MKL2 (MKL/myocardin-like protein 2) ELISA KIT人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒,
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:乳酸脱氢酶,染色液,H型,四唑盐法













