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酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:06
大鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒
大鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA试剂盒
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详细内容
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中文名称：酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)
英文名称：
产品规格：3×10ml|3×20ml
发货周期：1～3天
用途：
又称非特异性酯酶染色液，可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片的非特异性酯酶染色，亦可作抑制试验
注意事项：
其原理是酸性条件下细胞中的酸性酯酶将α-乙酸萘酚水解产生α-萘酚，α-萘酚再与六偶氮副品红偶联，生成不溶性红色沉淀，定位于细胞质。
储存条件：4℃，避光，6个月
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
异酮 Standard for GC,>99.5% (GC)质金属蛋白酶-17抗体CXCL9/MIG γ干扰素诱导单核因子抗体
间硝 standard for GC, ≥99.5% (GC)膜突蛋白抗体CXCL7/NAP-2/PPBP 血小板趋化因子7蛋白抗体
氮标准溶液5ng/ml,体:轻油麻疹病融合蛋白抗体CXCL5 上皮中性粒活化肽78抗体
氮标准溶液10ng/ml,体:轻油红膜蛋白55抗体CXCL4/PF4 血小板因子4抗体
氮标准溶液50ng/ml,体:轻油膜相关环指蛋白5抗体CXCL16 CXC趋化因子16抗体
氮标准溶液100ng/ml,体:轻油化肌增强因子2C抗体CXCL15/Lungkine 趋化因子CXCL15抗体
氮标准溶液200ng/ml,体:轻油线粒体核糖体蛋白MRP63抗体CXCL14 CXC趋化因子14抗体
二十八烷 standard for GC, ≥98.5% (GC)化肌增强因子2C抗体CXCL13/BCA1 B-淋巴趋化因子抗体
丽春红S Biological stain质金属蛋白酶13抗体CXCL13/BCA1 B-淋巴趋化因子抗体
炔 Standard for GC（剧品）酪氨单氧化酶微管相关蛋白MICAL抗体CXCL11 干扰素诱导T趋化因子抗体
胡椒 CP,99.0%（易制品）梅克尔-格鲁伯综合征相关蛋白抗体CXCL10 CXCL10趋化因子10/干扰素诱导蛋白10抗体
聚乙二400 色谱固定液，60℃+++++突变的黑色素瘤相关抗原1抗体CX3CR1 趋化因子受体1抗体
罗丹明B AR黑色素瘤相关抗原10抗体CX3CL1 CX3CL1抗体
癸二 色谱固定液，155℃丝裂原活化蛋白激酶激酶2抗体CWH43 壁合成蛋白43抗体
无水碳钠 ARG蛋白偶联受体24抗体CWF19L1 CWF19L1蛋白抗体
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注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
热门标签：酸性α-乙酸萘酚酯酶,染色液,ANAE法
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