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α-乙酸萘酚酯酶染色液(α-NAE法)
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:α-乙酸萘酚酯酶染色液(α-NAE法)
英文名称:
产品规格:3×10ml|3×20ml
发货周期:1~3天
用途:
又称非特异性酯酶染色液,可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片的非特异性酯酶染色,亦可作抑制试验
注意事项:
其原理是细胞中的非特异性酯酶将α-乙酸萘酚水解产生α-萘酚,α-萘酚再与重氮盐偶联,生成不溶性有色沉淀,定位于细胞质。
储存条件:4℃,避光,6个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
正己 standard for GC, ≥99.0% (GC)Myc因相关X因子抗体CYBR1 色素B还原酶1抗体
环戊 Standard for GC,>99.5%(GC)凋亡信号调节激酶1抗体CXXC5 二硫键氧化还原酶锌指蛋白5抗体
己内酰 色谱固定液NFKB激活蛋白1抗体CXX1/Cerebral protein 5 脑蛋白5抗体
2- Standard for GC(剧品)化Myc因相关X因子抗体CXorf56 X染色体开放阅读框56抗体
癸二二乙酯 standard for GC亚四氢叶还原酶MTHFR抗体CXorf36 脱羧酶蛋白体36抗体
邻二二壬酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)MEK1/MAPKK1抗体(N-端)CXorf36 脱羧酶蛋白体36抗体
乙 Standard for GC, ≥99.9% (GC)褪黑素受体1B抗体CXorf21 X染色体开放阅读框21抗体
二乙 超纯,≥99.5%(GC)多药耐药相关蛋白4抗体CXCR7/RDC1 表面趋化因子受体7抗体
乙酯 GCS,≥99.5% (GC) 多药耐药相关蛋白5抗体CXCR6 表面趋化因子受体6抗体
赤藓红B钠盐 Biological stain线粒体内膜蛋白抗体CXCR5/CD185 表面趋化因子受体5抗体
曙红Y,溶 Biological stain质金属蛋白酶-8/胶原酶2抗体CXCR3/CD183 表面趋化因子受体3抗体
乙二缩双(邻氨酚) 98%质金属蛋白酶11抗体CXCR3/CD183 表面趋化因子受体3抗体
甘油 色谱固定液质金属蛋白酶-12抗体CXCR2/CD182 表面趋化因子受体2抗体
正庚 Standard for GC质金属蛋白酶-15抗体CXC-R2 CXCR2/CD182
正庚 standard for GC, ≥98% (GC)质金属蛋白酶-16抗体CXCR1/IL-8RA 表面趋化因子受体1抗体
α-乙酸萘酚酯酶染色液(α-NAE法)膜蛋白Derlin抗体Human NFAT5(Nuclear factor of activated T-cells 5) ELISA KitCandida Elective 琼脂用于食品中Candida及酵母总数测定(Merck方法)
二脂酰甘油酰基转移酶抗体Human PAPD4 (Poly(A) RNA polymerase GLD2) ELISA KITM iddleBrook 7H10 琼脂用于分枝杆的分离培养
转录因子DP1抗体Human NOD1 (Nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 1) ELISA KITNa-对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐
间粘附分子非整合素蛋白3抗体Human ODC1(Ornithine decarboxylase) ELISA Kit5-尿苷一磷酸二钠盐
DNA依赖性蛋白激酶抗体Human OLIG1 (Oligodendrocyte transcription factor 1) ELISA KIT脱氧核糖核酸(鱼精)
磷酸化DNA依赖性蛋白激酶抗体Human OPHN1 (Oligophrenin-1) ELISA KIT25cm2三角斜口培养瓶
磷酸化DNA依赖性蛋白激酶抗体Human OPALIN (Opalin) ELISA KIT人趋化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA试剂盒,
蓬乱蛋白2抗体Human OBFC1 (CST complex subunit STN1) ELISA KIT人脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA试剂盒,BGP/Gehrelin ELISA kit
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:α-乙酸萘酚酯酶,染色液,α-NAE法













