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碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)
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详细内容
中文名称:碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)
英文名称:
产品规格:3×10ml|3×20ml
发货周期:1~3天
用途:
用于石蜡切片、冰冻切片、骨髓细胞涂片、血液涂片等的碱性磷酸酶染色,又称同时偶联法
注意事项:
碱性磷酸酶活性部位呈蓝色,位于胞桨中。非特异性反应少,结果可靠。
储存条件:-20℃,避光,6个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
叔丁 AR髓性白血病蛋白1抗体Cystatin A 胱抑素A/半胱氨蛋白酶抑制剂A抗体
三羟烷 98%化丝裂原活化蛋白激酶1抗体Cystatin A 胱抑素A/半胱氨蛋白酶抑制剂A抗体
AR,99.5%(剧品)组织相容性复合体2抗体Cyr61/IGFBP10/CCN1 富半胱氨肝素结合蛋白61抗体
金属镝 99.9% (REO)化雷帕霉素靶蛋白抗体CYP8A1/PTGIS 列环素合成酶抗体
金属铒 99.9% metals basis,粉末,50目化CpG结合蛋白2抗体CYP7B1 胆固25α7羟化酶抗体
金属镧 99.9% metals basis化雷帕霉素靶蛋白抗体CYP7A1 色素P450 7A1抗体/胆固7a羟化酶
镥 99.9% metals basisNADH复合体6抗体CYP5A1/Thromboxane synthase 血栓素合成酶抗体
镥 ingot, 99.9% metals basis黑色素瘤相关抗原11抗体CYP4A22 色素P4504A22抗体(脂肪Ω羟化酶)
金属镨 锭, 存放于油中,99.9% metals basis同源盒因Msx2抗体CYP4A1 色素P450 4A1抗体
金属钪 99.9% metals basis化丝氨/苏氨蛋白激酶MARK4抗体CYP46 胆固24羟化酶抗体
钪锭 99.9% metals basis膜型质金属蛋白酶胞质尾结合蛋白1抗体CYP46 胆固24S-羟化酶
镱 99.9%,块状周期调节蛋白P95抗体CYP450 色素P450单氧化酶抗体
镱粉 99.9%自噬微管相关蛋白轻链β3抗体CYP3A4 色素P450 3A4抗体
醋纤维素 乙酰:32.0-34.5 wt %有丝分裂周期蛋白MPP9抗体CYP3A1 色素P450 3A1抗体
醋乙烯 12 wt. %, 熔融指数8 g/10 min (190°C/2.16kg)减数分裂特异核结构蛋白1抗体CYP39A1 胆固24α7羟化酶抗体
碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)双特异性蛋白磷酸酶26抗体(丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶8)Human PPP2R4(Serine/threonine-protein phosphatase 2A activator) ELISA Kit人刚地弓形虫(T.gondii)ELISA试剂盒,T.gondii ELISA
阿米洛利结合蛋白1抗体Human PPME1 (Protein phosphatase methylesterase 1) ELISA KIT人5羟色(5-HT)ELISA试剂盒,5-HT ELISA
S期激酶活化蛋白DBF4A抗体Human PSKH1 (Serine/threonine-protein kinase H1) ELISA KIT人雌(E)ELISA试剂盒,E ELISA
着丝粒相关蛋白DSN1抗体Human PTH1R(PaRathyroid hormone/paRathyroid hormone-related peptide receptor) ELISA Kit人乌头酸酶2(ACO-2)ELISA试剂盒, ACO-2 ELISA
双皮层蛋白结构域蛋白DCDC2抗体Human PARG (Poly(ADP-ribose) glycohydrolase) ELISA KIT大鼠促性腺释放受体(GnRHR)ELISA试剂盒,
神经干树突调节蛋白DAGLα抗体Human NKAP(NF-kappa-B-activating protein) ELISA Kit兔子内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒,
对接蛋白4抗体Human PTPRCAP (Protein tyrosine phosphatase receptor type C-associated protein) ELISA KIT钩端螺旋体IgM(Lebtospira)ELISA试剂盒--动物,人
DULLARD蛋白抗体Human PACRGL (PACRG-like protein) ELISA KIT溶血性链球
热门标签:碱性磷酸酶,染色液,偶氮偶联法













