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碱性磷酸酶-PAS联合染色液
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:碱性磷酸酶-PAS联合染色液
英文名称:
产品规格:6×50ml
发货周期:1~3天
用途:
碱性磷酸酶染色与过雪夫试剂合用,同时显色碱性磷酸酶和PAS阳性物质。
注意事项:
适用于冰冻切片、石蜡切片,碱性磷酸酶活性部位呈黑色,PAS阳性物质呈紫红色。染色过程中注意控制过处理的时间,否则容易褪色。
储存条件:4℃,避光,6个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
2--1,3- 99%脂肪瘤相关蛋白抗体DAP3 死亡相关蛋白3抗体
顺二酐 AR,99.5%层粘连蛋白β4抗体DAP1 死亡相关蛋白1抗体
异丁 ACS光谱, ≥99.0%黄体激素释放激素/促性腺激素释放激素抗体DAO1/ABP1 阿米洛利结合蛋白1抗体
新戊二 99%蛋白赖氨-6-氧化酶抗体DAL1/EPB41L3 骨架4.1蛋白家族DAL1抗体
壬酚(混合物) SU白酪氨激酶受体抗体DAG1 肌相关蛋白DAG1抗体
对特辛酚(POP) 分析标准品同源盒转录因子LMX1A抗体DAD1 死亡防卫蛋白1抗体
对特辛酚(POP) 97%转化生长因子β1结合蛋白1抗体DACH2 转录调节因子DACH2抗体
酚 AR狂躁因同源蛋白MFNG抗体DACH1 命运决定因子DACH1抗体
1,2- GR,99.5%E3泛素蛋白连接酶MIB1抗体DAB2IP Dab2相互作用蛋白抗体
聚乙烯1788型 解度:87.0~89.0%(mol/mol)主导控制样蛋白1抗体DAB2 信号转导功能蛋白DAB2抗体
氢氧化 电子,99.999% metals basis,钠除外主导控制样蛋白2抗体DAAM1 形态发生紊乱关联激活因子1抗体
邻二酐 AR丝裂原活化蛋白激酶6抗体D.Aspartic acid D型天冬氨抗体
邻二酐 CP化丝氨/苏氨蛋白激酶MST4,MST3,STK25抗体Cytosine deaminase 胞嘧啶脱氨酶抗体
邻二酐 ACS表皮生长因子样蛋白Megf10抗体Cytomegalovirus pp65 巨病PP65/CMV低质脂蛋白抗体
氢氧化钠 AR,96%MPP4蛋白抗体Cytokeratin 5/CK5 角蛋白5抗体
碱性磷酸酶-PAS联合染色液磷酸化动力相关蛋白1抗体Human PITPNC1 (Cylasmic phosphatidylinositol transfer protein 1) ELISA KIT50 %卵黄乳液
DNA连接酶4抗体Human PTDSS1 (Phosphatidylserine synthase 1) ELISA KIT白头翁皂苷B4 Anemoside B4 Pulchinenoside B4
二肽基肽酶6抗体Human NAGA(Alpha-N-acetylgalactosaminidase) ELISA Kit黄芪皂苷 I Astragaloside I
二氢叶酸还原酶抗体Human CACNA1A(Voltage-dependent P/Q-type calcium channel subunit alpha-1A) ELISA Kit3-甲基环己醇
有丝分裂控制样蛋白DIS3L抗体Human NKAP(NF-kappa-B-activating protein) ELISA Kit苯二甲酸二烯丙酯
有丝分裂控制蛋白样DIS3L2抗体Human PTDSS1 (Phosphatidylserine synthase 1) ELISA KIT对羟基苯甲酸丙酯
DOM3Z蛋白抗体Human PCID2 (PCI domain-containing protein 2) ELISA KIT钽片
蓬乱蛋白2抗体Human PDIK1L (Serine/threonine-protein kinase PDIK1L) ELISA KIT人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒,
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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