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蔗糖-PBS溶液、20%
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:蔗糖-PBS溶液(30%)
英文名称:
产品规格:500ml
发货周期:1~3天
用途:
新鲜组织取材后,沉淀以去除多余水分,避免冷冻后产生冰晶
注意事项:
主要由蔗糖、PBS、防腐剂组成。
储存条件:4℃,6个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
1,2,4-三酐 97%LRIG1抗体DcR3/TR6 诱捕受体3抗体
双酚A CPLRIG3抗体DcR2/CD264/TNFRSF10D 诱捕受体2抗体
双酚A >99.0%(GC)肝肠钙粘连蛋白抗体DcR1 肿瘤坏死因子配体超家族成员10C
对叔丁酚 98%透明质受体抗体DCP 异常凝血酶原/脱-γ-羧凝血酶原抗体
对叔丁酚 分析标准品,>99.5%(GC)17号染色体开放阅读框82抗体DCN/Decorin 核心蛋白聚糖抗体
对叔丁酚 99%转录因子LMCD1抗体DCK 脱氧胞苷激酶抗体
正丁 AR,99%淋巴抗原76抗体DCIR/CLEC4A C型凝集素结构域家族4成员A抗体
2-丁酮 AR, ≥99%富含亮氨重复序列LRP15抗体DCHS1 钙粘蛋白19抗体
环己酮 AR,99.0%富含亮氨重复跨膜神经元蛋白1抗体DCC 结肠直肠癌缺失因抗体
环己酮 CP,99.0%层粘蛋白α2抗体DCBLD2 内皮和平滑肌衍生的神经纤毛蛋白抗体
环己酮 >99.5%(GC)内皮脂肪酶抗体DCAKD 脱辅酶A结构域蛋白抗体
环己酮 99.8%可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1抗体DCAF13 DCAF13蛋白抗体
环己酮 ACS, ≥99.0%层粘连蛋白β2抗体DCAF12/WDR40A 癌中心体相关蛋白抗体
环己酮 Standard for GC白衍生化学吸引素抗体Dbx2 大脑发育同源蛋白2抗体
N,N-二乙酰 AR,99.0%T淋巴易位蛋白2抗体DBX1 脑发育同源蛋白1抗体
蔗糖-PBS溶液(30%)DISC1 C端抗体Human PLAC1 (Placenta-specific protein 1) ELISA KIT3-二甲酸
DISC1 N端抗体Human PRLR(Prolactin receptor) ELISA Kit氟硼酸铵
多能发育相关基因2抗体Human PRLHR(Prolactin-releasing peptide receptor) ELISA Kit人白介素18(IL-18)ELISA试剂盒,IL-18 ELISA kit
结肠直肠癌缺失基因抗体Human PGM5 (Phosphoglucomutase-like protein 5) ELISA KIT人内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒,eNOS-3 ELISA kit
多巴脱羧酶抗体Human PGM3 (Phosphoacetylglucosamine mutase) ELISA KIT人抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒, TPO-Ab ELISA kit
防御素β1/Defensin β1抗体Human PRPS2 (Ribose-phosphate pyrophosphokinase 2) ELISA KIT人EJ抗体/抗甘氨酰tRNA合成酶抗体(EJ/GlyRS)ELISA试剂盒, EJ/GlyRS E
抗体Human PEAR1 (Plaet endothelial aggregation receptor 1) ELISA KIT人抗骨骼肌抗体(ASA)ELISA试剂盒,ASA ELISA KIT
DLX4抗体Human MYOM3(Myomesin-3) ELISA Kit人天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒,
热门标签:蔗糖-PBS溶液,30%













