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JYBL-Ⅱ脱钙液
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:JYBL-Ⅱ脱钙液
英文名称:
产品规格:500ml
发货周期:1~3天
用途:
快速脱钙液,比JYBL-Ⅰ脱钙液更迅速,对组织亦有损失。
注意事项:
主要由甲酸、福尔马林等组成,一般24h完成脱钙。
储存条件:室温,12个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
D-3-氨 98%白介素6抗体DP-II 桥粒斑蛋白2抗体
L-2-氨 97%低密度脂蛋白抗体DP-I 桥粒斑蛋白1抗体
三氟磺钕 98%LRRC19蛋白抗体DPH2 白喉酰生物合成样蛋白2抗体
三氟磺镍(II) 96%层粘连蛋白受体1单克隆抗体DPF2/D4 zinc and double PHD fingers family 2 双PHD-D4锌指蛋白2抗体
三氟磺镨 98%层粘连蛋白受体1单克隆抗体DPEP3 膜二肽酶3抗体
三氟磺 98%T活化连接蛋白抗体DPCR1 DPCR1蛋白抗体
DL-4-溴氨 99%LIX1抗体DP1/TFDP1 转录因子DP1抗体
BOC-D-炔甘氨 95%凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体抗体Doublecortin 双皮质素抗体
BOC-D-3-(2-吡啶)-氨 99%MD-1蛋白抗体Donkey Anti-rabbit IgG/RBITC 罗丹明标记的驴抗兔IgG
FMOC-D-4-溴氨 95%MD-2蛋白抗体Donkey Anti-rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的驴抗兔IgG
L-烯甘氨 95%淋巴管内皮透明质受体抗体Donkey Anti-rabbit IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的驴抗兔IgG
三氟磺钠 98%肝脏型脂肪结合蛋白抗体Donkey Anti-rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的驴抗兔IgG
三氟磺银(Ⅰ) 97%荧光素酶抗体Donkey Anti-rabbit IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的驴抗兔IgG
三氟磺钐 98%亮氨氨肽酶3抗体Donkey Anti-rabbit IgG/PE PE标记的驴抗兔IgG
三银 98%肝脏型脂肪结合蛋白抗体Donkey Anti-rabbit IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的驴抗兔IgG
JYBL-Ⅱ脱钙液磷酸化Disabled 1抗体Human SON (Protein SON) ELISA KIT人吲哚2,3-双加氧酶(IDO)ELISA试剂盒,
双皮质素抗体Human GPA33(Cell surface A33 antigen) ELISA Kit人血管紧张素Ⅰ转化酶(ACEⅠ)ELISA试剂盒,
D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体Human ATM(Serine-protein kinase ATM) ELISA Kit弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒,
磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体Human SORT1(Sortilin) ELISA Kit人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒,
磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体Human CAPN15 (Calpain-15) ELISA KIT人脂磷壁酸(LTA)ELISA试剂盒,
磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体Human HCN4(Potassium/sodium hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channel 4) ELISA Kit人游离血红蛋白(f-Hb)ELISA试剂盒,
膀胱癌缺失基因1Human SERBP1 (Plasminogen activator inhibitor 1 RNA-binding protein) ELISA KIT人血红蛋白H(HbH)ELISA试剂盒,
磷酸化膀胱癌缺失基因1抗体Human SIGIRR (Single Ig IL-1-related receptor) ELISA KITα/β干扰素受体(IFN-α/βR)ELISA试剂盒--动物,人
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