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天狼星红染色液
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:天狼星红染色液
英文名称:
产品规格:2×50ml|2×100ml
发货周期:1~3天
用途:
胶原纤维染色、分型
注意事项:
偏振光显微镜观察,Ⅰ型胶原纤维呈橙黄色或红色,Ⅲ型胶原纤维呈绿色,主要成分还包括Mayer苏木素。
储存条件:4℃,避光,12个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
白屈菜红碱 分析标准品,>98% 白介素-17抗体FBXO25 F-box蛋白家族FBXO25抗体
(+)-儿茶素 98%白介素-18/干扰素γ诱导因子抗体FBXO24 FBXO24蛋白抗体
天然辣椒碱 Nature,≥50% (HPLC)白介素1受体相关蛋白样1体蛋白抗体FBXO21 F-box蛋白21抗体
硫软骨素(鲨鱼) 95%白介素1β/IL-1β抗体FBXO18 F-box蛋白家族FBXO18抗体
金雀花碱 分析标准品白介素2抗体(大、小鼠)FBXO11 F-box蛋白相关蛋白11抗体
金雀花碱 98%白介素-2单克隆抗体FBXO11 F-box蛋白家族FBXO11抗体
98%白介素-23抗体FBXL5 FBXL5蛋白抗体
肉桂 分析标准品,>99.5%(GC)白介素4抗体FBXL3 FBXL3蛋白抗体
绿原 98%白介素6FBXL21/FBL3B FBXL21蛋白抗体
虫草素 98%白介素6抗体FBXL20 FBXL20蛋白抗体
木犀草苷 分析标准品,≥98%白介素6抗体FBXL17 FBXL17蛋白抗体
木犀草苷 ≥98.0% (HPLC) 抑制素A/Inhibin α抗体FBXL16 FBXL16蛋白抗体
梓 ≥97% (HPLC)鸡传染性喉气管炎病糖蛋白E抗体FBXL15 FBXL15蛋白抗体
β-胡萝卜素 96%小肠型脂肪结合蛋白抗体FbxL12 FBXL12蛋白抗体
姜黄素 AR白介素⁻⁷受体a抗体FBXL11 FBXL11蛋白抗体
天狼星红染色液胞浆动力蛋白中间链2抗体Human IRF3(Interferon regulatory factor 3) ELISA KitD-亮氨酸甲酯盐酸盐
抑癌蛋白DKK3抗体Human GUCY2C(Heat-stable enterotoxin receptor) ELISA KitN-乙酰-D-脯氨酸
单克隆抗体Human BPIFA2(BPI fold-containing family A member 2) ELISA Kit18B-甘草次酸 18-beta-Glycyrrhetinic acid
肿瘤坏死因子配体超家族成员10CHuman MST1P9(Putative macrophage-stimulating protein MSTP9) ELISA Kit人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA试剂盒,
干扰素诱导蛋白p58ipk抗体Human UTS2D(Urotensin-2B) ELISA Kit人鼠嗜酸粒趋化因子(ECF)ELISA试剂盒,
转录调节因子DACH2抗体Human HIST1H4A(Histone H4) ELISA Kit人成熟促进因子(MPF)ELISA试剂盒, MPF ELISA kit
穿膜蛋白DLK1抗体Human S100A7(Protein S100-A7) ELISA Kit人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)ELISA试剂盒, anti-cartilage
Dysferlin蛋白抗体Human CELA1(Chymotrypsin-like elastase family member 1) ELISA Kit人抗组蛋白(H2A-H2B)-DNA抗体/抗二聚体-DNA抗体ELISA试剂盒,H2A-H2B-D
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