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Masson三色染色液(固绿法)
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:Masson三色染色液(固绿法)
英文名称:
产品规格:7×50ml|7×100ml
发货周期:1~3天
用途:
经典胶原纤维染色,可区分胶原纤维和肌纤维。
注意事项:
染核后能更容易区分胶原纤维和肌纤维,本试剂盒采用经典的Weigert苏木素。其结果为:胶原纤维呈蓝色,胞核呈蓝褐色肌纤维、红细胞等呈红色。
储存条件:室温,避光,12个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
2--3--2- 98%IQCC蛋白抗体FHIT 脆性组氨三联体抗体
3--1-戊炔-3- 98%IQCA1蛋白抗体FGL2 凝血酶原酶(纤维介素)抗体
2--3-丁炔-2- 98%集成复杂蛋白亚单位3抗体FGFR5/FGFRL1 成纤维生长因子受体5抗体
羟乙叉二膦 60%水溶液干扰素alpha 14蛋白抗体FGFR4/CD334 成纤维生长因子受体4抗体
氨三亚膦 50%水溶液白介素6抗体FGFR3/CD333 成纤维生长因子受体3抗体
固体亚 99.97% metals basis白介素-10抗体FGFR2/CD332 成纤维生长因子受体2抗体
四氢氧化铵 AR,25%溶液白介素6抗体FGFR1OP2 FGFR1癌因伴侣蛋白2抗体
四氢氧化铵 五水合物 97%化内质网核信号转导蛋白a1抗体FGFR1OP/FOP 成纤维生长因子受体1原癌因伴侣蛋白抗体
1,4-对二苄 98%白介素28受体抗体FGFBP 纤维生长因子结合蛋白抗体
亚三乙酯 98%KB抑制蛋白激酶Ζ抗体FGF9 碱性成纤维生长因子9抗体
胆固油酯 99%胰岛素因增强结合蛋白1抗体FGF8/HBGF-8 成纤维生长因子8抗体
N-溴代丁二酰亚 CP,98.5%整合素β1结合蛋白2抗体FGF6 纤维母生长因子6抗体
戊二酐 98%线粒体翻译起始因子3抗体FGF5 纤维母生长因子5抗体
5-羟-2-戊酮 95%白介素27β抗体FGF4 纤维母生长因子4抗体
磺酐 98%胰岛素样生长因子1受体抗体FGF3/Oncogene INT2 纤维母生长因子3抗体
Masson三色染色液(固绿法)分裂周期相关蛋白Human RAB14(Ras-related protein Rab-14) ELISA Kit甲状腺素(T4)ELISA试剂盒--动物,人
猪瘟病抗体Human TACR3(Neuromedin-K receptor) ELISA KitL-缬氨酸
16号染色体开放阅读框72抗体Human TAGLN3(Transgelin-3) ELISA Kit丁香酸/3,5-二甲氧基-4-羟基苯甲酸 Syringic acid
补体C4 γ 链蛋白抗体Human ATP7A(Copper-transporting ATPase 1) ELISA Kit大黄素甲醚 Physcion
补体C4d-A蛋白抗体Human NEDD9(Enhancer of filamentation 1) ELISA KitHot Taq酶
补体C4b-A蛋白抗体Human HLA-DRB5(HLA class II histocompatibility antigen, DR beta 5 chain) ELISA KitT3 RNA聚合酶
磷酸化整合素β2/Integrin β2抗体Human S100A12(Protein S100-A12) ELISA Kit刀豆素A
磷酸化整合素β2/Integrin β2抗体Human MCTS1(Malignant T cell-amplified sequence 1) ELISA Kit邻菲啰啉盐酸盐
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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