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网状纤维染色液(改良Gordon-Sweets法)
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详细内容
英文名称:
产品规格:6×50ml
发货周期:1~3天
用途:
网状纤维染色,适用于冰冻切片、石蜡切片、火棉胶切片,可区分胶原纤维
注意事项:
见光易分解,使用恢复至室温,网状纤维呈黑色,细胞核呈红色,胶原纤维呈黄色。该法为改良型,省略调色等步骤。注意密闭保存。
储存条件:4℃,避光,3个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
三化锡 96%其它ELISA试剂盒白介素-1受体拮抗剂抗体FOXO1A 叉头蛋白O1抗体
三化锡 分析标准品新德里超细菌金属β-内酰酶-1(NDM-1)免疫试剂盒KB抑制蛋白激酶γ抗体FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 叉头蛋白O1/O3/O4抗体
酯 Standard for GC,>99%(GC)小尾寒羊增食欲素(orexin)免疫试剂盒化KB抑制蛋白激酶γ抗体FOXO1 叉头蛋白O1抗体
酯 95%小尾寒羊瘦素(LEP)免疫试剂盒化KB抑制蛋白激酶γ抗体FOXN1 叉头蛋白N1抗体
酯 分析标准品,≥99.8% (GC)小尾寒羊阿黑皮素原(POMC)免疫试剂盒化KB抑制蛋白激酶α/IKK α 抗体FOXM1/HFH 11 叉头蛋白M1抗体
酯 99%,光谱纯孕马血清促性腺激素(PMSG)免疫试剂盒化KB抑制蛋白激酶β抗体FOXL2 小睑裂综合征蛋白BPES抗体
酯 99%有机农药残留试剂盒化KB抑制蛋白激酶β抗体FOXJ1/HFH-4 叉头蛋白J1抗体
结晶四化锡 99.995% metals basis乙型流感HA 免疫试剂盒化KB抑制蛋白激酶α抗体FOXF1 叉头蛋白F1抗体
2-氧萘 98%犀牛皮质酮(CORT)免疫试剂盒化KB抑制蛋白激酶γ抗体FOXC1/FREAC3 叉头相关转录因子3抗体
2-氨-1,3- 98%田鼠睾酮(T)免疫试剂盒化KB抑制蛋白激酶β抗体FOXA2/HNF 3beta 肝核因子3抗体
丝氨盐盐 98%ELISA检测试剂盒干扰素alpha诱导蛋白6抗体FOXA1/HNF3-alpha 转录因子HNF-3α抗体
2,6-二-4-氨酚 98%丝裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)免疫试剂盒白介素-17E抗体fowl typhoid and pullorum disease 鸡白痢、鸡伤寒抗体
邻氨酚 98%双特异性丝裂原活化蛋白激酶5(MAP2K5)免疫试剂盒化胰岛素受体底物p-IRS-1/2抗体FOS B FosB蛋白抗体
3-氨-4-羟 97%双酚A(BPA)免疫试剂盒tRNA异亮氨连接酶抗体FOP/FGFR1OP FGFR1癌因伴侣蛋白抗体
邻氨对叔丁酚 98%食蟹猴胰高血糖素(GC)免疫试剂盒整合素α2抗体Follistatin 卵泡抑素抗体
网状纤维染色液(改良Gordon-Sweets法)磷酸化分裂周期蛋白25C抗体Human MCFD2(Multiple coagulation factor deficiency protein 2) ELISA Kit人甲肟列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA试剂盒,
磷酸化周期素依赖性激酶2抗体Human VIPR1(Vasoactive intestinal polypeptide receptor 1) ELISA Kit大鼠抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒,
质膜微囊蛋白-3抗体Human WTAP(Pre-mRNA-splicing regulator WTAP) ELISA Kit大鼠雌(E)ELISA试剂盒,
3号染色体开放阅读框34抗体Human LGALS3BP(Galectin-3-binding protein) ELISA KitXLD 培养基
CD134抗体Human SNX1(Sorting nexin-1) ELISA Kit马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)
单核趋化蛋白5抗体Human CFLAR(CASP8 and FADD-like apoptosis regulator) ELISA KitNa-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐
髓鞘相关糖蛋白CD57抗体Human ADCYAP1R1(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide type I receptor) ELISA Kit豆蔻明 Cardamonin
角蛋白13抗体Human VIPR1(Vasoactive intestinal polypeptide receptor 1) ELISA Kit乙酰辅酶A
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