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碱性固绿染色液
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:碱性固绿染色液
英文名称:
产品规格:2×50ml
发货周期:1~3天
用途:
显示细胞中碱性蛋白,尤其是组蛋白
储存条件:室温,避光,12个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
倍硫标准溶液 10μg/ml,u=6%大鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)免疫试剂盒癌高表达蛋白Hec1抗体Goat Anti-Bovine IgG/RBITC 罗丹明标记的羊抗牛IgG
菊酯 分析标准品,99.5%(剧品)大鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)免疫试剂盒化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体Goat Anti-Bovine IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的羊抗牛IgG
菊酯标准溶液 100μg/ml,u=3%(剧品)大鼠17-酮类固(17-KS)免疫试剂盒组蛋白去乙酰化酶1抗体Goat Anti-Bovine IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的羊抗牛IgG
菊酯标准溶液 10μg/ml,u=6%(剧品)大鼠17-羟孕烯酮免疫试剂盒半糖转移酶2抗体Goat Anti-Bovine IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的羊抗牛IgG
氟菊酯标准溶液 100μg/ml,u=3%大鼠17羟孕酮(17-OHP)免疫试剂盒化异染色质蛋白1抗体(果蝇)Goat Anti-Bovine IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的羊抗牛IgG
氟菊酯标准溶液 10μg/ml,u=4%大鼠17羟皮质类固(17-OHCS)免疫试剂盒异染色质蛋白1化抗体(果蝇)Goat Anti-Bovine IgG/PE PE标记的羊抗牛IgG
线 100μg/ml,u=3%(剧品)大鼠17-α睾酮(17-αMT)免疫试剂盒缺氧诱导因子2α /HIF-2α抗体Goat Anti-Bovine IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的羊抗牛IgG
线 10μg/ml,u=4%(剧品)大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)免疫试剂盒型流感病M2抗体Goat Anti-Bovine IgG/Gold 胶体金标记的羊抗牛IgG
炔氟草 分析标准品,99.4%大鼠12羟二十烷四烯(12-HETE)免疫试剂盒热休克蛋白-47抗体Goat Anti-Bovine IgG/FITC FITC标记的羊抗牛IgG
啶嘧磺隆 分析标准品,97%大鼠11β羟类固脱氢酶1型(11β-HSD1)免疫试剂盒人类状瘤病16抗体Goat Anti-Bovine IgG/Cy7 Cy7标记的羊抗牛IgG
氟啶 分析标准品,99%大鼠1,4,5-三肌(IP3)免疫试剂盒缺氧诱导因子1α 抗体HIF-1αGoat Anti-Bovine IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的羊抗牛IgG
氟节 分析标准品,97%大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)免疫试剂盒组蛋白H3抗体Goat Anti-Bovine IgG/Cy5 Cy5标记的羊抗牛IgG
解草啶 分析标准品,99.3%大鼠1,25-二羟维生素D(3)24-羟化酶,线粒体(CYP24A1)免疫试剂盒人类疱疹病8抗体/疱疹病8型Goat Anti-Bovine IgG/Cy3 Cy3标记的羊抗牛IgG
氟吡氧乙 分析标准品,97%大鼠1,25二羟维生素D3(1,25 DHVD3)免疫试剂盒人类巨病抗体Goat Anti-Bovine IgG/Bio 生物素标记的羊抗牛IgG
标准溶液 10μg/m,u=6~2%,酮大鼠 SCUBE1 免疫试剂盒人类疱疹病8抗体Goat Anti-Bovine IgG/APC APC标记的羊抗牛IgG
碱性固绿染色液蕈碱型乙酰胆碱受体M2抗体Human ADAMTS4(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 4) ELISA Kit花宝3号
促进凋亡基因抗体Human CHRM3(Muscarinic acetylcholine receptor M3) ELISA Kit萘酚绿B
原癌基因蛋白/活化蛋白1抗体Human KSR2(Kinase suppressor of Ras 2) ELISA Kit邻
死亡活化蛋白抗体Human VCL(Vinculin) ELISA Kit二苯乙醇酸
角蛋白19抗体Human VCAN(Versican core protein) ELISA Kit环辛酮
角蛋白2抗体Human KRT17(KeRatin, type I cytoskeletal 17) ELISA Kit联苯
角蛋白4抗体Human TNNT1(Troponin T, slow skeletal muscle) ELISA Kit正庚酸
色素b245轻链抗体Human S100A9(Protein S100-A9) ELISA Kit反式-2-己烯酸
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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