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嗜酸性粒细胞染色液
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详细内容
中文名称:嗜酸性粒细胞染色液
英文名称:
产品规格:2×100ml
发货周期:1~3天
用途:
嗜酸性粒细胞呈粉红色
注意事项:
变色酸、水组成
储存条件:室温,避光,12个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
双脒标准溶液 10μg/ml,u=4%大鼠艾杜糖硫酯酶(IDS)免疫试剂盒丝氨/苏氨蛋白激酶蛋白抗体GP65/SDFR1/NPTN 间质衍化因子受体1抗体
四唑嘧磺隆 分析标准品,99.5%大鼠癌胚抗原(CEA)免疫试剂盒HAUS5蛋白抗体GP1B/CD42b 血小板糖蛋白GPIb抗体
标准溶液 100μg/ml,u=4%(剧品)大鼠阿米洛利敏感钠通道α亚(SCNN1A)免疫试剂盒组织H4受体抗体GOT2 谷草转氨酶2抗体
标准溶液 10μg/ml,u=5%(剧品)大鼠阿立新A(Orexin A)免疫试剂盒mRNA cap转移酶抗体GOLPH2/GP73 高尔体膜蛋白GP73抗体
酰嘧磺隆 分析标准品,93%大鼠阿黑皮素原(POMC)免疫试剂盒5’-三聚核苷抗体Goat Anti-rat IgG/RBITC 罗丹明标记的羊抗大鼠IgG
莠灭净 分析标准品,98.8%大鼠δ氨乙酰脱水酶(ALAD)免疫试剂盒组氨三聚体核苷结合蛋白1抗体Goat Anti-rat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的羊抗大鼠IgG
唑嘧磺草 分析标准品,98%大鼠γ谷氨-半胱氨合成酶(γ-GCS)免疫试剂盒状腺促进激素alpha链Goat Anti-rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的羊抗大鼠IgG
标准溶液 100μg/ml,u=4%大鼠γ干扰素受体(IFN-γR)免疫试剂盒A型流感病H7N9凝集素抗体Goat Anti-rat IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的羊抗大鼠IgG
标准溶液 10μg/ml,u=6%大鼠γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒组蛋白去乙酰化酶3抗体Goat Anti-rat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的羊抗大鼠IgG
γ-六六六标准溶液 100μg/ml,u=3%大鼠γ分泌酶免疫试剂盒人乙肝表面抗原抗体(包被)Goat Anti-rat IgG/PE PE标记的羊抗大鼠IgG
γ-六六六标准溶液 10μg/ml,u=5%大鼠γ-氨丁受体亚α1(GABRA1)免疫试剂盒肾损伤分子1抗体(型肝炎病受体1)Goat Anti-rat IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的羊抗大鼠IgG
联菊酯 分析标准品,99%大鼠γ氨丁(GABA)免疫试剂盒组氨富含脯氨糖蛋白抗体Goat Anti-rat IgG/Gold 胶体金标记的羊抗大鼠IgG
联菊酯标准溶液 100μg/ml,u=3%,体:石油大鼠β-转导重复相容蛋白(β-TrCP)免疫试剂盒HER3受体抗体Goat Anti-rat IgG/FITC FITC标记的羊抗大鼠IgG
联菊酯标准溶液 10μg/ml,u=7%,体:石油大鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)免疫试剂盒化HER3受体抗体Goat Anti-rat IgG/Cy7 Cy7标记的羊抗大鼠IgG
苄嘧磺隆标准溶液 100μg/ml,u=3大鼠β素(BTC)免疫试剂盒化HER3受体抗体Goat Anti-rat IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的羊抗大鼠IgG
嗜酸性粒细胞染色液卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD5抗体Human RELN(Reelin) ELISA Kit人伤寒抗原(St-Ag)ELISA试剂盒, St-Ag ELISA
卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD6抗体Human MRC2(C-type mannose receptor 2) ELISA Kit人大疱性类天疱疮抗体(BP)ELISA试剂盒,BP ELISA
卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD6抗体Human NR1H3(Oxysterols receptor LXR-alpha) ELISA Kit人白色念珠(C.albicans)ELISA试剂盒,C.albicans ELISA
周期通道和神经分化蛋白1抗体Human CCR6(C-C chemokine receptor type 6) ELISA Kit人金属硫蛋白2(MT2)ELISA试剂盒,MT2 ELISA
凝集蛋白家族10抗体(肝)Human NPEPPS(Puromycin-sensitive aminopeptidase) ELISA Kit人横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α )ELISA试剂盒,sm Actinin-α
铜代谢结构域蛋白7抗体Human NPEPPS(Puromycin-sensitive aminopeptidase) ELISA Kit人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA试剂盒,MPIF-1/CCL23 ELISA
COMM结构域蛋白4抗体Human DEFB127(Beta-defensin 127) ELISA Kit人天青素(AZU)ELISA试剂盒,
Cordon bleu蛋白样1抗体Human DEFB129(Beta-defensin 129) ELISA Kit人蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA试剂盒,
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:嗜酸性粒细胞,染色液













