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嗜酸性粒细胞稀释液(计数液)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:嗜酸性粒细胞稀释液(计数液)
英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
用途:
用于嗜酸性粒细胞计数
注意事项:
由桃红等组成。
储存条件:4℃,6个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
草标准溶液 10μg/ml,u=6%大鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)免疫试剂盒同源盒蛋白C6抗体GPR109A/Puma gamma G蛋白偶联受体109A抗体
杀螟丹 分析标准品,99%大鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(sIL-1RⅡ)免疫试剂盒同源盒蛋白C4抗体GPR109A/HM74A G蛋白偶联受体109A抗体
杀螟丹标准溶液 100μg/ml,u=3%大鼠白介素1β体(pro-IL1B)免疫试剂盒同源盒蛋白D13抗体GPNMB/Osteoactivin GPNMB抗体
杀螟丹标准溶液 10μg/ml,u=3%大鼠白介素1β(IL-1β)免疫试剂盒组蛋白H1.4样蛋白抗体GPLD1/GPI-PLD 糖蛋白脂酶D抗体
莎稗 分析标准品,98.5%大鼠白介素1α(IL-1α)免疫试剂盒组蛋白H1FOO抗体GPKOW G蛋白修补结构域蛋白5抗体
乙草 分析标准品,95.5%大鼠白介素18(IL-18)免疫试剂盒同源盒蛋白B6抗体GPIP137 糖脂酰肌锚定蛋白137抗体
乙草标准溶液 100μg/ml,u=2%大鼠白介素17(IL-17)免疫试剂盒错构素蛋白抗体GPI 糖脂酰肌抗体
乙草标准溶液 10μg/ml,u=3%大鼠白介素16(IL-16)免疫试剂盒化组蛋白H1FOO抗体GPD2 线粒体甘油三脱氢酶2抗体
三唑锡 分析标准品,99%大鼠白介素15(IL-15)免疫试剂盒单纯疱疹病1型转录调节因子ICP22抗体GPD1 甘油三脱氢酶1抗体
阿达唑 分析标准品,95.5%大鼠白介素13(IL-13)免疫试剂盒H2A组蛋白家族E蛋白抗体GPCR TAS1R3 G蛋白偶联受体TAS1R3抗体
阿特拉津标准溶液 100μg/ml,u=4%大鼠白介素12(IL-12/P70)免疫试剂盒H2B组蛋白家族M蛋白抗体GPCR GPR97 G蛋白偶联受体97抗体
阿特拉津标准溶液 10μg/ml,u=7%大鼠白介素12(IL-12/P40)免疫试剂盒H2B组蛋白家族成员W蛋白抗体(特异性)GPBB/PYGB 脑糖原化酶抗体
阿特拉津 分析标准品,99%大鼠白介素11(IL-11)免疫试剂盒PWWP域包含蛋白1抗体GPAM 线粒体甘油3酰转移酶抗体
双脒 分析标准品,97%大鼠白介素10(IL-10)免疫试剂盒高密度脂蛋白抗体GPA33 糖蛋白A33抗体
双脒标准溶液 100μg/ml,u=2%,体:大鼠白蛋白免疫试剂盒HEAT重复内含蛋白1蛋白抗体GPA/GYPA/CD235a 血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗体
嗜酸性粒细胞稀释液(计数液)磷酸化二氢嘧啶酶样2抗体Human APOD(Apolipoprotein D) ELISA Kit利血平 Reserpine
脑衰蛋白反应调节蛋白4抗体Human CXCR4(C-X-C chemokine receptor type 4) ELISA Kit天青II
卷曲螺旋结构域蛋白87抗体Human AMY2(Amylase Alpha 2, Pancreatic) ELISA Kit9-芴甲醇
卷曲螺旋结构域蛋白92抗体Human DNMT1(DNA(cytosine-5)-methyltransferase 1) ELISA Kit铟粒
卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD8抗体Human GREM1(Gremlin-1) ELISA Kit人B瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒,Bcl-2 ELISA kit
大脑亮氨酸拉链结构域蛋白抗体Human TERT(omerase reverse transcriptase) ELISA Kit人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒,AFP ELISA kit
卷曲螺旋结构域蛋白93抗体Human IL17B(Interleukin-17B) ELISA Kit人Jo1抗体/抗组氨酰tRNA合成酶抗体(Jo1/HRS)ELISA试剂盒,Jo1/HRS ELI
卷曲螺旋结构域蛋白96抗体Human TLN1(Talin-1) ELISA Kit人抗可提取核抗原抗体(ENA-Ab)ELISA试剂盒,ENA-Ab ELISA
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