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中性红染色液(液泡系用)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:中性红染色液(液泡系用)
英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
用途:
用于细胞中液泡系的活体染色
注意事项:
液泡系包括高尔基复合体、溶酶体、内质网、转运泡、吞噬泡等。中性红是液泡系的一活性染色剂,在细胞处于生活状态时,只将液泡系染成红色,细胞质和细胞核不被染色。
储存条件:室温,12个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
油 AR大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)免疫试剂盒HOXB4抗体His tag 聚组氨抗体标签抗体
三硅烷 99%大鼠过氧化氢酶(CAT)免疫试剂盒化HER2受体抗体Hirudin 水蛭素抗体
乙 Standard for GC,≥99.5%(GC)大鼠过敏素/补体片断4a(C4a)免疫试剂盒组蛋白去乙酰化酶6抗体HIRA/DGGR1 组蛋白替换精蛋白DGGR1抗体
乙 99.8%,无水大鼠果糖(FRA)免疫试剂盒化组蛋白去乙酰化酶6抗体HIPK4 同源相互作用蛋白激酶4抗体
乙 AR,98.5% 大鼠胱抑素SN(CST1)免疫试剂盒组蛋白去乙酰化酶7抗体HIPK3 Fas相互作用蛋白激酶3抗体
乙标准溶液1000ppm,质:大鼠胱抑素SA(CST2)免疫试剂盒化组蛋白去乙酰化酶7抗体HIPK2 Fas相互作用蛋白激酶2抗体
乙 >99.5%(GC)大鼠胱抑素S(CST4)免疫试剂盒组蛋白去乙酰化酶8抗体HIP4/CBS 丝氨羧半胱氨合成酶抗体
乙 分析标准品大鼠胱抑素D(CST5)免疫试剂盒化HER4抗体HIP2 泛素蛋白连接酶E2抗体
间二 Standard for GC, ≥99.5% (GC)大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)免疫试剂盒组氨tRNA连接酶抗体HIP1R/HIP12/HIP3 亨丁顿舞蹈症相互作用蛋白12抗体
间二 99.0%大鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)免疫试剂盒鸡新城疫血凝素-神经氨酶抗体HINT1 组氨三聚体核苷结合蛋白1抗体
间二 CP,95.0% 大鼠胱天蛋白酶7(CASP7)免疫试剂盒热休克蛋白105抗体HIG1/HIGD1A 缺氧诱导因1蛋白抗体
间二 AR,98%大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)免疫试剂盒肝核因子1α抗体HIFPH4 缺氧诱导因子脯氨酰4羟化酶抗体
间二标准溶液1mg/ml,溶剂:,水质分析大鼠胱硫-γ-裂解酶(CSE)免疫试剂盒缺氧诱导因子1β /HIF-1β抗体HIF3 alpha 缺氧诱导因子3α/HIF-3α抗体
邻二 Standard for GC,≥99% (GC)大鼠胱硫β-合酶(CBS)免疫试剂盒热休克转录因子2抗体HIF-1β/ARNT1 缺氧诱导因子1β 抗体
邻二 for HPLC,≥96.0% (GC)大鼠瓜氨免疫试剂盒HA tag标签抗体HIF-1 Alpha 缺氧诱导因子1α 抗体HIF-1α
中性红染色液(液泡系用)7号染色体开放阅读框13抗体Human B4GALT5(Beta-1,4-galactosyltransferase 5) ELISA Kit人促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒,FSH ELISA
7号染色体开放阅读框29抗体Human CAMKK2(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2) ELISA Kit人色素b561(cytb561)ELISA试剂盒,cytb561 ELISA
8号染色体开放阅读框72抗体Human CBLB(E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B) ELISA Kit人羟基胶原吡啶交联(OH-PYD)ELISA试剂盒, OH-PYD ELISA
7号染色体开放阅读框30抗体Human CD5L(CD5 antigen-like) ELISA Kit人环加氧酶2(COX-2)ELISA试剂盒,COX-2 ELISA
7号染色体开放阅读框57抗体Human FAM3B(Protein FAM3B) ELISA Kit人白介素1β转换酶(ICE)ELISA试剂盒, ICE ELISA
7号染色体开放阅读框36抗体Human MYOF(Myoferlin) ELISA Kit人丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA试剂盒
7号染色体开放阅读框42抗体Human GFRA1(GDNF family receptor alpha-1) ELISA Kit人心肌肌凝蛋白轻链1(CMLC-1)ELISA试剂盒,
7号染色体开放阅读框43抗体Human GLIPR1(Glioma pathogenesis-related protein 1) ELISA Kit人分泌型球蛋白A(SIgA)ELISA试剂盒,
热门标签:中性红,染色液,液泡系用













