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结晶紫MES溶液(0.1%,pH6.0)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:结晶紫MES溶液(0.1%,pH6.0)
英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
用途:
细胞附着实验
注意事项:
主要由结晶紫和0.2M MES组成。
储存条件:室温,避光,12个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
草 Standard for GC,≥99.6% 大鼠金属转运蛋白1(MTP1)免疫试剂盒DNA复制抑制因子抗体HPR 结合珠蛋白相关蛋白抗体
草 ≥99.998% (metals basis)大鼠金属硫蛋白2(MT-2)免疫试剂盒G蛋白α抑制蛋白2抗体HPL/PL 人胎盘泌素抗体
草 ≥99.9999% (metals basis)大鼠金属硫蛋白(MT)免疫试剂盒G蛋白偶联受体γ4抗体HPGD/PGDH1/Prostaglandin dehydrogenase 1 列腺素脱氢酶1抗体
4-溴磺酰 98%大鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)免疫试剂盒G氨丁B型受体2抗体HPCL2 植烷酰辅酶A羟化酶2抗体
3-环己 99%大鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)免疫试剂盒葡萄糖调节蛋白78抗体(热休克蛋白70蛋白5)HP1 gamma 异染色质蛋白1-γ抗体
上光油铁罐(直径127mm*250mm)大鼠解整合素样金属蛋白酶19(ADAM19)免疫试剂盒葡萄糖调节蛋白94抗体HP1 alpha 异染色质蛋白1-α(HP1α)抗体
上光油铁罐 直径73mm*高度150mm大鼠睫状神经营养因子(CNTF)免疫试剂盒糖原合酶激酶-3β抗体HOXD10 同源盒蛋白HOXD10抗体
天然黄蜂蜡 医药(CP2005版)大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)免疫试剂盒糖原合酶激酶-3β抗体HOXC9 同源盒蛋白HOXC9抗体
蜂蜡 46-60°C大鼠结缔组织生长因子(CTGF)免疫试剂盒三鸟苷环水解酶抗体HOXc8 HOXc8抗体
蜂蜡 62-67°C大鼠结蛋白(Des)免疫试剂盒促代谢型谷氨受体5抗体HOXB8 同源盒蛋白B8抗体
天然白蜂蜡 医药(CP2005版)大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)免疫试剂盒生长调节致癌因-1抗体GROaHOXB5 同源盒蛋白HOXB5抗体
3,5-二溴 98%大鼠角化生长因子(KGF)免疫试剂盒G蛋白偶合受体激酶1抗体HOXB4 HOXB4抗体
5--4,6-二羟嘧啶 97%大鼠角化内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)免疫试剂盒促胃泌素释放肽抗体HOXB2 同源盒蛋白B2抗体
4,6-二-5-嘧啶 98%大鼠胶质系来源的神经营养因子(GDNF)免疫试剂盒化G蛋白通路抑制蛋白1抗体HOXA9 同源盒蛋白HOXA9抗体
二聚环戊二烯 97%,Endo大鼠胶原吡啶交联(PYD)免疫试剂盒脑糖原化酶抗体HOXA5 同源异型盒因HOXA5蛋白抗体
结晶紫MES溶液(0.1%,pH6.0)磷酸化酪氨酸激酶C-SRC抗体Human TMEM126A(Transmembrane protein 126A) ELISA Kit人血管紧张素Ⅱ受体1(ANGⅡR-1)ELISA试剂盒,
酪蛋白激酶1/casein kinase Iα抗体Human ENHO(Adropin) ELISA Kit人促有丝分裂因子(MF/MPF)ELISA试剂盒,
半胱氨酸延伸蛋白α抗体Human TARBP2(RISC-loading complex subunit TARBP2) ELISA Kit人他克莫司(FK506)ELISA试剂盒,
磺基转移酶CSPS抗体Human DRAM1(DNA damage-regulated auhagy modulator protein 1) ELISA Kit人凝血因子Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)ELISA试剂盒,
富含半胱氨酸蛋白2抗体Human TBC1D1(TBC1 domain family member 1) ELISA Kit人胰岛素受体底物2(IRS-2)ELISA试剂盒,
软骨酸性蛋白1抗体Human TBPL1(TATA box-binding protein-like protein 1) ELISA Kit人肽B(CecB)ELISA试剂盒,
富含半胱氨酸蛋白结合蛋白抗体Human THAP4(THAP domain-containing protein 4) ELISA Kit人髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒,
CREB调节转录激活因子3抗体Human MBOAT4(Ghrelin O-acyltransferase) ELISA Kit小鼠抗酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒,
热门标签:结晶紫MES溶液,0.1%,pH6.0













