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Hoechst33258/PI细胞凋亡染色试剂盒
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详细内容
中文名称:Hoechst33258/PI细胞凋亡染色试剂盒
英文名称:
产品规格:100T
发货周期:1~3天
用途:
凋亡细胞的形态学特征检测
注意事项:
Hoechst33258是一种荧光染料,可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Propidium Iodide简称PI,又称碘化丙啶,对人体有刺激性。
储存条件:-20℃,避光,12个月
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
对二二酯 99%大鼠神经特异性烯化酶(NSE)免疫试剂盒G蛋白偶联受体115抗体IL-32/NK4 白介素32抗体
乙二 重蒸馏,≥99.5%大鼠神经肽Y(NPY)免疫试剂盒G蛋白偶联受体10抗体IL-31RA/CRL3 白介素31受体a抗体
N-(2-羟乙)乙二 99%大鼠神经肽W(NP-W)免疫试剂盒β-葡萄糖脑苷脂酶抗体IL-31 白介素31抗体
异 >99.0% (GC)(含100ppm BHT稳定剂)大鼠神经肽Nesfatin-1 免疫试剂盒半糖凝集素相关蛋白A抗体IL-3(human) 白介素3抗体(人)
α-烯 Standard for GC大鼠神经丝蛋白(NF)免疫试剂盒半糖凝集素12抗体IL-3 白介素3抗体
1,2- ACS大鼠神经生长因子受体(TNFR superfamily,member 16)(NGFR)免疫试剂盒γ氨丁运载蛋白3抗体IL-2R gamma/CD132 白介素2受体γ链抗体
1,3- 98%大鼠神经生长因子体(proNGF)免疫试剂盒GTP酶IMAP家族成员1抗体IL-29/IFNL1 白介素29抗体
多乙烯多 AR大鼠神经生长因子(NGF)免疫试剂盒GTP酶IMAP家族成员2抗体IL-28B/IL-28C 白介素28B抗体
三乙烯四 AR,70%大鼠神经颗粒素(NG/NRGN)免疫试剂盒GTP酶IMAP家族成员3抗体IL-28A/IFNL2 白介素28A抗体
四乙烯五 95%大鼠神经胶质纤维性蛋白(GFAP)免疫试剂盒GTP酶IMAP家族成员4抗体IL-27R/TCCR 白介素27受体抗体
乙酰 98%大鼠神经降压素(NTS)免疫试剂盒GTP酶IMAP家族成员5抗体IL-26/AK155 白介素26抗体
0.95大鼠神经调节蛋白2(NRG2)免疫试剂盒G蛋白调节诱导神经突增生蛋白2抗体IL-23R 白介素-23受体抗体
分析标准品,95%大鼠神经调节蛋白1(NRG1)免疫试剂盒GTP酶IMAP家族成员7抗体IL-23 白介素-23抗体
黄豆苷原 分析标准品,≥98%大鼠上皮中性粒活化肽78(ENA⁻⁷8/CXCL5)免疫试剂盒GTP酶IMAP家族成员8抗体IL-22R 白介素-22受体抗体
黄豆苷原 98%大鼠山梨脱氢酶(SDH)免疫试剂盒G蛋白调节诱导神经突增生蛋白1抗体IL-22BP/IL22RA2 白介素22受体结合蛋白抗体
Hoechst33258/PI细胞凋亡染色试剂盒NK抑制性受体3DL1抗体Human ATP2A3(Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 3) ELISA Kit磷酸盐葡萄糖胨水培养基
7号染色体开放阅读框46抗体Human ECE1(Endothelin-converting enzyme 1) ELISA Kit磷酰二肽
蛋白磷酸酶PP2A癌抑制蛋白抗体Human NDNF(Protein NDNF) ELISA Kit胰凝乳蛋白酶原
巨噬甘露糖受体CD206抗体Human IFNA14(Interferon alpha-14) ELISA Kit三十烷醇
衍生C-型凝集素抗体Human C19orf10(UPF0556 protein C19orf10) ELISA Kit人阿立新A(Orexin A)ELISA试剂盒,Orexin A ELISA kit
5号染色体开放阅读框60抗体Human UBE3A(Ubiquitin-protein ligase E3A) ELISA Kit人抗肝特异性脂蛋白抗体(LSP)ELISA试剂盒,LSP ELISA kit
CD44V5抗体Human PLA2G2A(Phospholipase A2, membrane associated) ELISA Kit人腮腺炎病IgM ELISA试剂盒,
22号染色体开放阅读框23抗体Human TNFRSF10B(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B) ELISA Kit人促肾上腺皮质释放因子(CRF)ELISA试剂盒, CRF ELISA
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