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Hoechst33342染色液(1mg/ml)
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详细内容
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中文名称:Hoechst33342染色液(1mg/ml)
英文名称:Hoechst33342 Staining Solution(1mg/ml)
产品规格:1ml|5×1ml
发货周期:1~3天
用途:
细胞周期分析、活细胞染色等
注意事项:
Hoechst33342是一种荧光染料,可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。染色染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
储存条件:-20℃,避光,12个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
纳米二氧化锡 99.99% metals basis,50⁻⁷0nm大鼠丝氨蛋白酶抑制剂alpha-1 免疫试剂盒化GADD153抗体ILT2/CD85j 表面免疫球蛋白样转录因子2抗体
硒粉 99.9% metals basis,200目大鼠水闸蛋白1(Cldn1)免疫试剂盒G蛋白αS抗体(鸟嘌呤核苷结合蛋白Gα s)ILP2 抑制凋亡样蛋白2抗体
碲粉 粉末,99.99% metals basis,100目大鼠水通道蛋白5(AQP-5)免疫试剂盒G蛋白β4抗体/鸟嘌呤核苷结合蛋白β亚4ILK-1 整合素连接激酶-1抗体
高纯锡 99.999% metals basis,1-6mm,颗粒大鼠水通道蛋白4(AQP-4)免疫试剂盒G蛋白β2抗体/鸟嘌呤核苷结合蛋白β亚2ILDR1 免疫球蛋白样结构域受体1抗体
锌 99.999% metals basis大鼠水通道蛋白3(AQP-3)免疫试剂盒G蛋白γ2抗体/鸟嘌呤核苷结合蛋白γ2抗体IL-9 白介素9抗体
硫博来霉素 1.5-2.0 units/mg 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)免疫试剂盒化糖原合酶激酶3β抗体IL-9 白介素9抗体
聚乙烯缩丁 航空大鼠水通道蛋白1(AQP-1)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR92蛋白抗体IL-8/CXCL8 白介素8抗体
药用塑料袋 630*900*0.09mm,用于乘装5-25kg固体大鼠水通道蛋白0(AQP-0)免疫试剂盒己糖6脱氢酶抗体IL-8/CXCL8 白介素8抗体
4-溴联 98%大鼠双氢睾酮(DHT)免疫试剂盒G蛋白偶联受体γ14抗体IL⁻⁷Ra/CD127 白介素⁻⁷受体a抗体
4-溴联 分析标准品大鼠瘦素(LEP)免疫试剂盒肠高血糖素相关肽抗体IL⁻⁷ 白介素7抗体
3-溴联 分析标准品大鼠嗜性粒阳离子蛋白(ECP)免疫试剂盒葡萄糖转运蛋白10抗体IL-6R Beta/CD130/gp130 白介素6受体β抗体IL-6Rβ
3-溴联 97%大鼠嗜性粒过氧化物酶(EPO)免疫试剂盒肠高血糖素相关肽抗体IL-6R alpha 白介素6受体α抗体IL-6Rα
高精度150KG电子称(上海恒器厂) 大称量150KG,精度10G大鼠嗜粒趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1)免疫试剂盒G蛋白偶联受体120抗体IL-6 (NT) 白介素6抗体(N端)
对溴酚 98%大鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)免疫试剂盒G蛋白偶联受体40抗体IL-6 白介素6抗体
对溴 99%大鼠视黄结合蛋白4(RBP-4)免疫试剂盒20号染色体开放阅读框100抗体IL-6 白介素6抗体
Hoechst33342染色液(1mg/ml)组织蛋白酶L抗体Human NRTN(Neurturin) ELISA Kit偶氮氯膦Ⅰ
丝/苏氨酸蛋白激酶II β抗体(casein kinase IIβ)Human AXIN2(Axin-2) ELISA Kit羧甲基葡聚糖凝胶C-25
角蛋白18抗体Human VASP(Vasodilator-stimulated phosphoprotein) ELISA Kit羧甲基葡聚凝胶C-50
转化生长因子β1结合蛋白抗体Human PPP1CA(Serine/threonine-protein phosphatase PP1-alpha catalytic subunit) ELISA Kit2-氟苯乙酮
22号染色体开放阅读框45抗体Human TRIM3(Tripartite motif-containing protein 3) ELISA Kit人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒,MUC5AC ELISA kit
22号染色体开放阅读框32抗体Human TOP1(DNA oisomerase 1) ELISA Kit人抗单核抗体(AMA)ELISA试剂盒,AMA ELISA
CD5L抗体Human PTPRF(Receptor-type tyrosine-protein phosphatase F) ELISA Kit人抗角蛋白抗体(AKA)ELISA试剂盒,AKA ELISA
CD6抗体Human AFM(Afamin) ELISA Kit人利什曼原虫抗体(Leishimaria Ab)ELISA试剂盒,Leishimaria Ab E
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:Hoechst33342,染色液,1mg/ml













