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细胞膜完整性检测试剂盒
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详细内容
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中文名称:细胞膜完整性检测试剂盒
英文名称:
产品规格:500T
发货周期:1~3天
E42细胞膜完整性检测试剂盒是利用E系列探针进行细胞染色的试剂盒。本试剂盒中的E42 细胞染色探针为红色荧光标记的细胞探针,具有550/683nm 的大激发/发射波长。
E42探针是对细胞膜损伤细胞进行染色的试剂,不能穿透正常细胞膜,只有当细胞膜完整性受到影响时才可以染色细胞,进入细胞后会与细胞内蛋白质紧密结合,可有效标记膜不完整细胞。
储存条件:染料-20℃避光保存;避免反复冻融;稀释液2-8℃保存。
有效期:一年。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
硫 99.999% metals basis大鼠血红蛋白(Hb)免疫试剂盒鸟嘌呤核苷结合蛋白X抗体KCNC4/KV3.4 离子通道蛋白Kv3.4抗体
发烟硫 AR大鼠血管性血友病因子裂解酶(vWF-cp)免疫试剂盒GRAM结构域蛋白2抗体KCNC3/Kv3.3 离子通道蛋白Kv3.3抗体
锑 USP, 99.0-103.0%大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)免疫试剂盒γ-谷氨酰转移酶轻链2抗体KCNC1 离子通道蛋白Kv3.1抗体
二酮 ≥99.0%(GC)大鼠血管舒缓激肽(BK)免疫试剂盒原钙粘蛋白γA1抗体KCNAB1/Kv beta 1 电压门控通道蛋白1抗体
异丁(MIBC) 99%大鼠血管生成抑制因子免疫试剂盒G蛋白偶联受体70抗体KCNA7 电压阀门通道混合器相关亚家族成员7抗体
异丁酮 for HPLC, ≥99.5%大鼠血管生成素样蛋白6(ANGPTL6)免疫试剂盒G蛋白偶联受体71抗体KCNA5 电压阀门通道混合器相关亚家族成员5抗体
乙烯 99%,含10-15ppm 4-叔-丁邻二酚稳定剂大鼠血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)免疫试剂盒谷氨受体δ2/GluR-δ2抗体KChIP2 通道相互作用蛋白2抗体
水合联氨 AR,80%溶液大鼠血管生成素4(ANG-4)免疫试剂盒血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗体KCC2/SLC12A5 神经离子转运蛋白抗体
胡椒 CP,99.0%(易制品)大鼠血管生成素2(ANG-2)免疫试剂盒谷氨脱羧酶67抗体KBTBD4 BTB-kelch蛋白家族4抗体
六偏钠 AR大鼠血管生成素1(ANG-1)免疫试剂盒生长抑制DNA损伤因45抗体KBTBD10 BTB-kelch蛋白家族10抗体
5-氨喹啉 99%大鼠血管生长素(ANG)免疫试剂盒胃泌素抑制肽抗体KBP KBP蛋白抗体
4-溴代三 97%大鼠血管内皮粘附分子1(VCAM-1)免疫试剂盒葡萄糖转运蛋白4抗体Kazrin Kazrin蛋白抗体
4,7-二羟-1,10-菲罗啉 98.0%大鼠血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)免疫试剂盒脂酰蛋白聚糖-3抗体KATNA1/Katanin p60 A1 剑蛋白p60亚A1抗体
4,4′-二壬-2,2′-联吡啶 98.0%大鼠血管内皮生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)免疫试剂盒糖皮质激素受体抗体katanin p80 剑蛋白p80抗体
4,4′-二壬-2,2′-联吡啶 98.0%大鼠血管内皮生长因子D(VEGF-D)免疫试剂盒胰高血糖素样肽-1抗体KAT4 周期因1蛋白抗体
细胞膜完整性检测试剂盒血小板内皮黏附分子1抗体Human ATXN1(Ataxin 1) ELISA Kit人骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒,BMPR-1A ELISA
CD34抗体Human ATF-6(Activating Transcription Factor 6) ELISA Kit人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员2(EAR2)ELISA试剂盒,
CD36抗体Human Aβ40(Amyloid Beta 40) ELISA Kit人内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒,
凋亡加强结构域蛋白6抗体Human ATGA/TGAB(Anti-Thyroid-Globulin Antibody) ELISA Kit人己糖激酶(HK)ELISA试剂盒,
凋亡加强结构域蛋白17抗体Human ATXN1(Ataxin 1) ELISA Kit人类似RIKEN cDNA 3110050K21 基因 ELISA试剂盒,
凋亡加强结构域蛋白4抗体Human Aβ42(Amyloid Beta 42) ELISA Kit人可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒,
4号染色体开放阅读框34抗体Human ARO(Aromatase) ELISA Kit人血清总补体(CH50)ELISA试剂盒,
酪蛋白激酶1γ3/CKI γ3抗体Human ARRβ1(Arrestin Beta 1) ELISA Kit人纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒,
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3.为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:细胞膜完整性检测,试剂盒













