当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 细胞生物学试剂 > 细胞组织染色 > 细胞骨架染色试剂盒-C12
细胞骨架染色试剂盒-C12
企业档案
会员类型:旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累,可浏览访问
(41-90)良好信誉积累,可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累,可持续信赖
阿仪网旗舰版会员:10年
最后认证时间:
注册号: 【已认证】
法人代表: 【已认证】
参观次数:6822336
详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:细胞骨架染色试剂盒-C12
英文名称:
产品规格:500T
发货周期:1~3天
细胞骨架(cytoskeleton)是真核细胞中由蛋白质聚合而成的三维的纤维状网架体系。细胞骨架包括微丝、微管和中间纤维。细胞骨架在维持细胞形态,承受外力、保持细胞内部结构的有序性方面起重要作用。细胞骨架肌动蛋白是球形的、大约42kd的蛋白,在几乎所有的真核细胞都存在。这是一个非常保守的蛋白,在各物种差异不超过20%。肌动蛋白是两种细胞内丝状结构的构成单体:微丝(三种主要的细胞骨架成分之一),以及细肌丝(是肌肉细胞收缩复合物的一部分)。肌动蛋白参与很多重要的细胞功能,包括肌肉收缩,细胞移动,细胞分裂和胞质分裂、小泡和细胞器的运动、细胞信号,以及细胞连接和细胞形态的保持和建立。
显示细胞骨架的常用方法有两种:骨架蛋白染色法和免疫荧光染色法。骨架蛋白染色法具有简单易行的特点,但不能区分骨架蛋白的组成,有些类型的纤维太细,在光学显微镜下无法分辨,常用于骨架形态及完整性研究;免疫荧光染色法可特异显示骨架蛋白,是用一种微丝解聚抑制剂,它与肌动蛋白纤丝有强亲和作用,使肌动蛋白纤丝稳定,抑制解聚,且只与F-actin 结合.因此,利用荧光标记可以清晰显示细胞中微丝的形态,利用荧光显微镜对荧光标记的细胞骨架进行观察,可以得到清晰的实验结果.具有更普遍的应用意义。
储存条件:染料-20℃避光保存;稀释液2-8℃保存。
有效期:六个月。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2.避光保存及使用。
3.为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
四(三膦)铂 Pt 15.2%大鼠牙本质质蛋白1(DMP1)免疫试剂盒G氨丁A型受体α4/GABAA Rα4抗体KIAA1522 KIAA1522蛋白抗体
三(二亚苄酮)二钯 Pd 21.5%大鼠循环免疫复合物(CIC)免疫试剂盒G氨丁A型受体α6/GABAA Rα6抗体Ki-67 (Proliferation Marker) Ki67蛋白抗体
四(三膦)钯(0) 99.8% metals basis, Pd 9.0%大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)免疫试剂盒化γ1氨丁受体GABAA Rβ1抗体KGF/FGF7 纤维母生长因子7抗体
三(三膦)二化钌 98%大鼠血小板因子3(PF-3)免疫试剂盒G氨丁受体β2/GABAA Rβ2抗体KF1/ZFP103 锌指蛋白103抗体
三膦化铑 RH 11.1%大鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)免疫试剂盒G蛋白偶联受体17抗体Ketohexokinase 肝果糖激酶抗体
聚乙烯缩丁 航空大鼠血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)免疫试剂盒G蛋白偶联受体102抗体Keratocan 角膜蛋白多糖抗体
聚乙烯缩丁 M.W.40,000⁻⁷0,000大鼠血小板衍生生长因子B(PDGF-B)免疫试剂盒G蛋白偶联受体136抗体Keratan Sulfate 硫角质素抗体
聚乙烯缩丁 M.W.90,000-120,000大鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)免疫试剂盒G蛋白偶联受体126抗体KEAP1/KLHL19 胞质接头蛋白Keap1抗体
聚乙烯缩丁 M.W.170,000-250,000大鼠血小板衍生生长因子AA(PDGF-AA)免疫试剂盒G蛋白偶联受体105抗体KDM5C/Jarid1C/SMCX 组蛋白去化Jarid1C抗体
二硅化钼 99%大鼠血小板衍生生长因子A(PDGF-A)免疫试剂盒G蛋白偶联受体C5B抗体KDM5B/PLU1/Jarid1B 组蛋白去化酶JARID1B抗体
铝镍合金 Ni:47%大鼠血小板生成素(TPO)免疫试剂盒G蛋白偶联受体33抗体KDM4C/GASC1/JMJD2C 鳞状癌增强蛋白1抗体
氧化钙 <160 nm particle size (BET), 98%大鼠血小板膜糖蛋白IIb(GPIIb)免疫试剂盒谷氨受体红藻氨离子1抗体KDM1 组蛋白赖氨特异性脱酶1抗体
亚铂铵 铂含量:52.0%大鼠血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)免疫试剂盒一般受体肌相关支架蛋白1抗体KDEL (ER Marker) 赖氨,天冬氨,谷氨,亮氨相关序列抗体
双(1,5-环辛二烯)-三氟磺铑 98%大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)免疫试剂盒谷氨受体红藻氨离子5抗体KCTD5 离子通道四聚体结构域蛋白5抗体
钯 Pd 26.2%大鼠血小板活化因子(PAF)免疫试剂盒棕榈酰转移酶GODZ抗体KCTD12 离子通道多聚体结构域蛋白12抗体
细胞骨架染色试剂盒-C12CD4抗体Human BACE1(Beta-site APP Cleaving Enzyme 1) ELISA Kit兔子基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒,
CD44抗体Human BANP(BTG3 Associated Nuclear Protein) ELISA Kit兔肾素(Renin)ELISA试剂盒,
白共同抗原抗体Human BAG3(Bcl2 Associated Athanogene 3) ELISA Kit红螯光壳螯虾卵黄脂磷蛋白/卵黄磷蛋白(Lv/Vn)ELISA试剂盒,
CD5抗体Human BALP(Bone Alkaline Phosphatase) ELISA KitLB肉汤
间粘附分子-1抗体Human BCAN(Brevican) ELISA KitL-甘-甘-白三肽
神经粘附分子1抗体Human BCL2L1/BCL-X(Bcl-2 Like Protein 1/Bcl2 Associated X Protein) ELISA Kit光甘草定 Glabridin
L选择素抗体Human BCAR1(Breast Cancer Anti Estrogen Resistance 1) ELISA Kit高良姜素 Galangin
CD68抗体Human C1QTNF9(C1q and Tumor Necrosis Factor Related Protein 9) ELISA Kit甘草苷 Liquiritin
热门标签:细胞骨架染色,试剂盒-C12













