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线粒体超氧化物染色试剂盒-M13
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详细内容
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中文名称:线粒体超氧化物染色试剂盒-M13
英文名称:
产品规格:30T|50T
发货周期:1~3天
M13线粒体超氧化物染色/检测试剂盒是利用M系列探针进行线粒体超氧化物特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的M13线粒体超氧化物染色探针为红色荧光标记的线粒体探针,具有510/580nm 的大激发/发射波长。
M13线粒体超氧化物染色探针是一种细胞渗透型的对活细胞中的线粒体体进行选择性染色的一类新型荧光染料,该探针可以选择性标记线粒体,包含标记线粒体的弱巯基反应性的氯甲基官能团。只需简单孵育细胞,即可穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上。一旦进入线粒体后,快速被超氧化物氧化,并产生红色荧光。M13线粒体超氧化物染色探针只可被超氧化物氧化,而不被其他活性氧类(ROS)和活性氮类(RNS)氧化。氧化产物结合核酸后,可产生大量红色荧光。
储存条件:染料-20℃避光保存;避免反复冻融;稀释液2-8℃保存。
按每个样用200μl染料计,试剂盒可以做30-150个样或60-300个样;
按每个样用100μl染料计,试剂盒可以做60-300个样或120-600个样。
有效期:六个月。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
(2S,3aS,7aS)-2-羧八氢吲哚 98%猴B病(BV)免疫试剂盒G蛋白偶联受体18抗体LC3C 微管相关蛋白轻链3C抗体
4,4'-二羧二 98%猴25羟维生素D3(25 HVD3)免疫试剂盒G蛋白偶联受体65抗体LC3B/MAP LC3β/MAP1A 自噬微管相关蛋白轻链3抗体
3,4'-二氨二 97%大鼠ELISA试剂盒生长终止特异性同源盒因抗体LC3 α/MAP1A/MAP LC3 Alpha/Beta 自噬微管相关蛋白轻链3抗体
2-氢醌 98%大鼠组织因子与活化凝血因子7复合物免疫试剂盒谷氨受体2抗体LBP1/Upstream Binding Protein 1 上游结合蛋白1抗体
1,3-二(4-氨氧) 98%大鼠组织因子途径抑制物(TFPI)免疫试剂盒谷氨受体3抗体Layilin 透明质受体抗体
2-吡啶 98%大鼠组织因子(TF)体 免疫试剂盒谷氨受体4抗体Layilin 透明质受体抗体
对氨叔丁酯 98%大鼠组织因子(TF)免疫试剂盒促代谢型谷氨受体1抗体LATS2 肿瘤抑制因LATS2抗体
3,5-二氨三氟 98%大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA) 免疫试剂盒甘氨受体α4抗体LATS1 肿瘤抑制因LATS1抗体
4-叔丁环己 98%大鼠组织多肽抗原(TPA)免疫试剂盒生长分化因子8抗体LAT/LAT1 T活化连接蛋白抗体
间三氟 99%大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)免疫试剂盒化糖原合酶激酶-3β抗体LASS6 长寿相关因lASS6抗体
2-乙酰吡啶 98%大鼠组织蛋白酶K(cath-K)免疫试剂盒Glu-Glu tag抗体LASS5 长寿相关因lASS5抗体
2-乙酰-2-噻唑啉 97%大鼠组蛋白H2b(histon-H2b)免疫试剂盒胰高血糖素样肽-2抗体LASS4 长寿相关因lASS4抗体
鱼腥草 98%大鼠组N-转移酶(HNMT)免疫试剂盒甘氨受体alpha 1/2/3型抗体LASS3 长寿相关因lASS3抗体
3-巯乙酯 96%大鼠组(HIS)免疫试剂盒抑制型G蛋白α3抗体LASS2 肿瘤转移抑制因1抗体
乙糠硫酯 99%大鼠足标记蛋白/足盂蛋白(PCX)免疫试剂盒促性腺激素释放激素受体抗体LASS1 长寿相关因lASS1抗体
线粒体超氧化物染色试剂盒-M13肿瘤/抗原1B/1AHuman COL2(Collagen Type Ⅱ) ELISA Kit大鼠复合列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒,
磷酸化分裂周期蛋白25B抗体Human COL3(Collagen Type Ⅲ) ELISA Kit快速硫化氢试验琼脂 用于弯曲杆的硫化氢试验(GB标准)
跨膜蛋白12抗体Human c-myc(c-myc Oncogene Product) ELISA KitD-环丝氨酸 加入250ml TSC琼脂基础中
球蛋白超家族成员16抗体Human COL4(Collagen Type IV) ELISA KitDL-半胱氨酸盐酸盐无水物
中心体和纺锤体相关蛋白1抗体Human CMLC-1(Cardiac Myosin Light Chains 1) ELISA KitL-甘-谷二肽
9号染色体开放阅读框153抗体Human CNR1(Cannabinoid Receptor 1, Brain) ELISA KitFMOC-L-苯丙氨酸
4号染色体开放阅读框19抗体Human CK-13/KRT13(CytokeRatin 13) ELISA Kit4-甲基伞花基磷酸钠
4号染色体开放阅读框27抗体Human CNTN4(Contactin 4) ELISA Kit宝石红550
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:线粒体超氧化物染色,试剂盒-M13













