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巴氏染色试剂盒(EA50)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:巴氏染色试剂盒(EA50)
英文名称:
产品规格:400ml
发货周期:1~3天
细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料的亲和力较强;而细胞浆则相反,它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。巴氏染色液利用这一特性对细胞进行多色性染色,细胞经染色后能清晰地显示细胞的结构,胞质透亮鲜丽,各种颗粒分明,细胞核染色质非常清楚,从而较容易发现异常细胞。通过巴氏染色可反映出细胞在炎症刺激下和癌变后的形态学变化,对早期发现和诊断一些病变和肿瘤具有较重要意义。
巴氏染色法是临床细胞学检查常用的传统染色方法,在妇科检查中,巴氏染色细胞学检查是宫颈癌及癌病变的较常用筛查方法。同时巴氏染色还可观察女性激素水平和检测生殖道病原体如念珠菌、滴虫等的感染。其中EA50染液为EA36的改良型,其操作方法与EA36相同。一般认为,EA36和EA50较适用于妇科标本,改良EA65染液较常用于非妇科标本(如胸、腹水等脱落细胞)。
储存条件:室温密封保存。
有效期:六个月。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
3-羟 97%鸡白介素1β(IL-1β)免疫试剂盒G蛋白偶联受体MRGX2蛋白抗体LYK5 蛋白激酶LYK5抗体
5ˊ-尿苷二钠 99%鸡白介素18(IL-18)免疫试剂盒G蛋白偶联受体RDC1蛋白抗体LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗体
蚯蚓纤溶酶(蚓激酶) 大于12000u/mg鸡白介素17(IL-17)免疫试剂盒G蛋白偶联受体TAS1R1蛋白抗体LY-86/MD-1 MD-1蛋白抗体
TPCK-胰蛋白酶 BAEE >10000 Unit/mg鸡白介素15(IL-15)免疫试剂盒G蛋白偶联受体TGR7蛋白抗体Ly-6G/Gr-1 淋巴抗原6G抗体
锌 AR鸡白介素12(IL-12/70)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR157蛋白抗体LXR alpha 肝脏X受体抗体
聚乙二单 平均分子量500鸡白介素10(IL-10)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR176蛋白抗体Lxn/Latexin 羧肽酶抑制剂抗体
油山梨酯(司班80) 药用鸡白介素1(IL-1)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR10蛋白抗体Lumican 膜聚糖蛋白抗体
吐温80 药用鸡γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒G蛋白偶联受体C5L2蛋白抗体Luciferase 荧光素酶抗体
乙酰 98%鸡β内酰酶(β-lactamase)免疫试剂盒G蛋白偶联受体EX33蛋白抗体Lubricin/SZP 浅表层粘膜蛋白多糖抗体
3,4-二羟 98%鸡β干扰素(IFN-β/IFNB)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR102蛋白抗体LTBP4 转化生长因子β结合蛋白4抗体
3,4-二羟 分析标准品,≥99%鸡α酮戊二脱氢酶(α-KGDHC)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR37样蛋白1抗体LTB4-R2 白三烯B4受体2抗体
丹皮酚 99%鸡α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR105蛋白抗体LTB4-R1/BLTR 白三烯B4受体1抗体
丹皮酚 分析标准品鸡α干扰素(IFN-α)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR12蛋白抗体LTA4H 白三烯A4水解酶抗体
大麦芽碱 分析标准品,≥99%鸡α1性糖蛋白(OGCHI)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR110蛋白抗体LST1 淋巴特异性转运蛋白1抗体
酞 99%鸡α/β水解酶域包含蛋白5(ABHD5)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR125蛋白抗体LSP1 白F肌动蛋白结合蛋白抗体
巴氏染色试剂盒(EA50)乙酰胆碱受体体蛋白AChRα1抗体Human F7(Coagulation Factor VII) ELISA Kit人N端外显肽(Ext-N)ELISA试剂盒,
猪瘟病包膜糖蛋白E2抗体Human ERK(ELK-Related Tyrosine Kinase) ELISA Kit人维生素B6(VB6)ELISA试剂盒,
冷休克结构域蛋白C2抗体Human EPHA10(Ephrin Type A Receptor 10) ELISA Kit人多巴(DA)ELISA试剂盒,
碳酸酐酶10抗体Human EPYC(Epiphycan) ELISA Kit小鼠5羟色(5-HT)ELISA试剂盒,
L选择素抗体Human EphA2(Tyrosine protein kinase receptor A2) ELISA Kit大鼠羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒,
致癌基因C-Myc抗体Human EphA2(Tyrosine protein kinase receptor A2) ELISA Kit大鼠抗增殖核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒,
胆囊收缩素8抗体Human ERK(ELK-Related Tyrosine Kinase) ELISA Kit大鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒,
上皮钙粘附分子抗体Human ERK1(Extracellular Signal Regulated Kinase 1) ELISA Kit大鼠白介素18(IL-18)ELISA试剂盒,
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