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亚甲基蓝染色试剂盒
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:亚甲基蓝染色试剂盒
英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
亚甲蓝染液可以将细胞核染成蓝色,用做细胞或细菌染色剂,可以用于细胞、细菌、酵母、组织等样本的染色。
储存条件:室温避光保存。
有效期:一年。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
1-丁烷 standard for GC, ≥99.8% (GC) 鸡马立克氏病病(MDV)抗体(IgM)免疫试剂盒凝血因子10抗体MARK2 丝氨/苏氨蛋白激酶MARK2抗体
2,4-二 99%鸡马立克氏病病(MDV)抗体(IgG)免疫试剂盒凝血因子11轻链抗体MARCO 巨噬清道夫受体抗体
邻二二烯酯 CP鸡卵转铁蛋白(OT)免疫试剂盒凝血因子12重链抗体MARCKS 氨蛋白激酶C底物Marcks抗体
3,5-二酚 98%鸡卵清白蛋白免疫试剂盒FIGNL1蛋白抗体MARCH9 膜相关环指蛋白9抗体
3,5-二酚 99%鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)免疫试剂盒FAM70A蛋白抗体MARCH8 膜相关环指蛋白8抗体
2,3-二 99%鸡卵黄蛋白原(VTG)免疫试剂盒含纤维蛋白原C结构域蛋白1抗体MARCH7/Axotrophin 膜相关环指蛋白7抗体
N,N-二异乙 99%鸡硫类肝素(HS)免疫试剂盒F-box蛋白相关蛋白6抗体MARCH6 膜相关环指蛋白6抗体
N,N-二异乙 重蒸馏,99.5%鸡流行性乙型脑炎抗体IgG(JE IgG)免疫试剂盒化成纤维生长因子受体底物2抗体MARCH5 膜相关环指蛋白5抗体
六氟异 99.5%鸡酯酶Cγ链(PLCγ1)免疫试剂盒椎骨蛋白2抗体MARCH4 膜相关环指蛋白4抗体
异佛尔酮 97%鸡酯酶C(PLC)免疫试剂盒凝血因子VIIMARCH3 膜相关环指蛋白3抗体
2--2,4-戊二 99%鸡烯酮羧激酶,质质[GTP](PCK1)免疫试剂盒凝血因子10抗体MARCH2 膜相关环指蛋白2抗体
聚乙二单 均分子量350 鸡粒特异性抗核抗体(GS-ANA)免疫试剂盒脆性X综合征相关蛋白AFF2抗体MARCH11 膜相关环指蛋白11抗体
聚乙二单 均分子量750 鸡粒巨噬集落激因子(GM-CSF)免疫试剂盒肌侧索硬化症相关蛋白FGGY抗体MARCH10 膜相关环指蛋白10抗体
聚乙二单 平均分子量500鸡粒集落激因子受体(G-CSFR)免疫试剂盒肌侧索硬化症相关蛋白FIG4抗体MARCH1 膜相关环指蛋白1抗体
聚乙二单 平均分子量5000鸡可溶性血管内皮蛋白C受体(sEPCR)免疫试剂盒黄素腺嘌呤二核苷抗体MAPKAPK5/PRAK p38调节/激活蛋白激酶抗体
亚甲基蓝染色试剂盒小脑变性相关蛋白2抗体Human FGβ(Fibrinogen Beta) ELISA Kit人颗粒溶素(GNLY)ELISA试剂盒,
分裂周期2相关蛋白激酶7抗体Human FGα(Fibrinogen Alpha) ELISA Kit小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA试剂盒,
A型产气荚膜梭(魏氏梭)Human f-Hb(Free Haemoglobin) ELISA Kit大鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒,
磷酸化角蛋白18抗体Human FLNα(Filamin A, Alpha) ELISA Kit兔纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒,
胞嘧啶脱氨酶抗体Human FGα(Fibrinogen Alpha) ELISA Kit巨噬集落激因子(M-CSF)ELISA试剂盒--动物,人
C2GNT3蛋白抗体Human FGβ(Fibrinogen Beta) ELISA Kit对氯苯甘氨酸
磷酸化原癌基因c-Jun抗体Human FcγR3B(Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIb Receptor) ELISA Kit大叶茜草素 Mollugin
磷酸化原癌基因c-Jun抗体Human POTE-E(POTE-E(POTE Ankyrin Domain Family Member E)) ELISA Kit赤霉素GA3
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