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TRAP染色试剂盒
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:TRAP染色试剂盒
英文名称:
产品规格:30T
发货周期:1~3天
抗酒石酸酸性磷酸酶主要存在于正常人肺泡巨噬细胞等部位的TRAP和存在于细胞白血病人脾脏TRAP 均在细胞滤泡中,并不释放入血液,血液中TRAP 绝大部分来源于破骨细胞。因而测量血液中TRAP可以了解破骨细胞的功能状态。
在碱性的缓冲液中,细胞内酸酸性磷酸酶催化底物水解,其生成物进而与一种稳定的重氮盐偶联,生成不溶性的偶氮染料沉淀,当底物中存在酒石酸时,该反应只出现在特异性细胞中。
本试剂盒适用于细胞涂片、细胞爬片、血涂片、骨髓涂片、冰冻切片及石蜡切片等的染色。阳性反应为鲜红色或深红色颗粒,定位于胞浆当中。
储存条件及有效期:2-8℃保存;三个月。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
三叔丁 药用鸡肿瘤坏死因子β(TNF-β)免疫试剂盒富含亮氨跨膜纤连蛋白1抗体MEF2D 肌特异性增强因子2D抗体
三叔丁 98%鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)免疫试剂盒富含亮氨跨膜纤连蛋白2抗体MEF2C 肌增强因子2C抗体
三叔丁 分析标准品鸡脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)免疫试剂盒富含亮氨跨膜纤连蛋白3抗体MEF2B 肌增强因子2B抗体
无水柠檬 AR, ≥99.5% (T)鸡脂多糖/内素(LPS)免疫试剂盒牛纤维蛋白原抗体MEF2A 肌增强因子2抗体
蓖麻油 USP鸡脂蛋白脂酶(LPL)免疫试剂盒FAM172A蛋白抗体MeCP2 化CpG结合蛋白2抗体
蓖麻油 CP鸡孕激素/孕酮(PROG)免疫试剂盒化粘着斑激酶抗体Measles virus fusion protein 麻疹病融合蛋白抗体
玉米油 试剂鸡游离脂肪(FFA)免疫试剂盒化粘着斑激酶抗体ME1 胞浆苹果酶1抗体
玉米油 药用鸡抑制素B(INH-B)免疫试剂盒化脆性组氨三联体抗体MDR1/p-GP/CD243 (N-terminus) 多药耐药蛋白/P-糖蛋白抗体
尼泊金乙酯 CP,99.0% 鸡抑制素A(INH-A)免疫试剂盒化FRA-1蛋白抗体MDR1/p-GP/CD243 (C-terminus) 多药耐药蛋白/P-糖蛋白抗体(C端)
羊毛脂 药用鸡乙酰辅酶A羧化酶α(ACACA)免疫试剂盒化Fas相关死亡结构域蛋白抗体MDMX MDM2样P53蛋白结合抗体
羊毛脂 CP鸡胰高血糖素(GC)免疫试剂盒化碱性成纤维生长因子受体1抗体MDM2 双微体2癌因抗体
DL-苹果 AR,99.5%鸡胰岛素样生长因子2(IGF2)免疫试剂盒化叉头蛋白家族抗体MDH1 可溶性苹果脱氢酶抗体
山梨 >99.0%(T)鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)免疫试剂盒化叉头蛋白3A抗体MDGA2 神经元膜糖蛋白锚定蛋白2抗体
山梨 CP,98%鸡胰岛素(INS)免疫试剂盒化叉头蛋白3A抗体MDFIC 肌原调节抑制蛋白抗体
山梨 分析标准品鸡一氧化氮(NO)免疫试剂盒化叉头蛋白3A抗体MCT1 单羧转运蛋白-1抗体
TRAP染色试剂盒壁合成蛋白43抗体Human GDN(Glia Derived Nexin) ELISA KitL-羟基脯氨酸
19号染色体开放阅读框29抗体Human GH2(Growth Hormone 2) ELISA KitL-(-)樟脑磺酸
磷酸化p21蛋白抗体Human GHAb(Anti-Growth Hormone Antibody) ELISA KitL-肌肽
磷酸化周期检测点激酶2抗体Human GPⅡb/Ⅲa(Plaet Membrane Glycoprotein Ⅱb/Ⅲa complex) ELISA Kit1,8-二羟基葸醌 1,8-Dihydroxyanthraqui
磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体Human GHITM(Growth Hormone Inducible Transmembrane Protein) ELISA Kit番泻苷C Sennoside C
磷酸化周期素依赖性激酶2抗体Human GADL1(Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) ELISA KitDL-硒代蛋氨酸
磷酸化周期检测点激酶1抗体Human GA(Glycated Albumin) ELISA Kit胡黄连苷-Ⅲ Picroside-Ⅲ
磷酸化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体Human GABA(Gamma-aminobutyric acid) ELISA Kit葡聚糖T50
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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